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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western bloting转印求教
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zzx219

木虫 (小有名气)

[交流] western bloting转印求教 已有10人参与

我做湿转，为什么电压设100V， 电流才有130mA。一般不都是快300mA了吗？这是怎么回事？感觉marker转印的很不清楚。
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zzxwalkzone
1楼 2013-10-21 15:01:26
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yaodi0226

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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amisking: 金币+6, 鼓励新虫发帖交流，欢迎常来！ 2013-10-21 17:59:43
我们做的时候都是调节电流100，电压大概是40，转1-2h，放冰盒中
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2楼2013-10-21 15:31:51
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zzx219

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yaodi0226 at 2013-10-21 15:31:51
我们做的时候都是调节电流100，电压大概是40，转1-2h，放冰盒中

我的按照80V转了两个小时半，没有转动，marker还在胶上。不知道怎么回事？

[ Last edited by zzx219 on 2013-10-21 at 16:13 ]
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zzxwalkzone
3楼2013-10-21 16:10:10
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DBWJ

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是滤纸在压的时候接触上了呢？
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4楼2013-10-21 16:25:24
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zzx219

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by DBWJ at 2013-10-21 16:25:24
是不是滤纸在压的时候接触上了呢？

嗯，滤纸不能接触哪里？不能接触夹子吗？
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zzxwalkzone
5楼2013-10-21 16:36:53
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yeastworm

新虫 (初入文坛)
恒流400mA
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6楼2013-10-21 20:50:03
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DBWJ

金虫 (小有名气)
★
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就是做三明治的时候上下的滤纸不能接触上的，接触上了就不走膜了，电流就直接从接触的滤纸那个地方过去了
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7楼2013-10-22 09:26:16
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DBWJ

金虫 (小有名气)
三明治最好是让上下的滤纸稍微小于中间的胶，这样防止接触
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8楼2013-10-22 09:26:56
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rainbaiyun

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-25 13:22:48
一般做湿转都是控制电流的，我一般都是电流100mA，电压50左右，42kD的转50-60min，刚刚好~
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9楼2013-10-22 09:54:57
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daibingling

铁虫 (正式写手)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-25 13:22:58
从做三明治开始，首先上下滤纸不可以接触，赶气泡以后，湿转控制电流200mA，我做230kD的，转两个半小时，都没问题。还有就是你的转膜缓冲液，新配的PH转的就快。
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10楼2013-10-22 10:08:45
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