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donne5222

金虫 (小有名气)

[求助] Cu2+的抑菌实验

我现在做Cu2+的抑菌实验,想测试一些Cu2+对细菌的最小抑制浓度,我曾使分别使用过硝酸铜,硫酸铜,酸铜,氯化铜作为Cu2+来源,但是只要向细菌培养基中添加哪怕5mM的的试剂,溶液的PH值就迅速下降到5左右,这样细菌肯定死了,但不一定是Cu2+杀死的,测试结果肯定不准确。但如果用NaOH调制PH为6.5以上,就会出现Cu(OH)2的沉淀,Cu2+又没有了。  不知道各位有没有更好的方法啊?
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liyu6655

禁虫 (小有名气)

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2楼2013-10-22 15:20:14
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

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【答案】应助回帖

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donne5222: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-10-23 13:54:52
donne5222(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2014-03-23 23:23:21
我不是做抑菌的,不过想到的解决方法有几个
一是使用响应pH值得缓冲液作为对照,从而排除pH对实验的影响
二是使用醋酸铜这类弱酸盐,应该可以改善pH降低的问题
三是在实验中加入EDTA螯合铜离子,做一个阴性对照
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
3楼2013-10-22 17:03:56
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donne5222

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu6655 at 2013-10-22 15:20:14
用固体培养基做抑菌圈不行吗?

谢谢你的建议,但即便是做抑菌圈也无法避免因PH降低而将细菌致死的可能。 我就想单纯的分析Cu2+,不希望有其他的干扰因素
4楼2013-10-23 10:54:04
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donne5222

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by duruo at 2013-10-22 17:03:56
我不是做抑菌的,不过想到的解决方法有几个
一是使用响应pH值得缓冲液作为对照,从而排除pH对实验的影响
二是使用醋酸铜这类弱酸盐,应该可以改善pH降低的问题
三是在实验中加入EDTA螯合铜离子,做一个阴性对照

您好,谢谢你的建议。方法二我也试过,但是PH也很低;方法三,EDTA虽然能够螯合铜离子,也有可能把培养基中的其他金属离子螯合掉。方法一挺有启发的,但您能稍微详细一点吗,我不是太明白,谢谢!
5楼2013-10-23 13:58:23
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

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donne5222(红舟流星代发): 金币+3, 代扣代发金币 2014-03-23 23:23:11
引用回帖:
5楼: Originally posted by donne5222 at 2013-10-23 13:58:23
您好,谢谢你的建议。方法二我也试过,但是PH也很低;方法三,EDTA虽然能够螯合铜离子,也有可能把培养基中的其他金属离子螯合掉。方法一挺有启发的,但您能稍微详细一点吗,我不是太明白,谢谢!...

拼音打错了,应该是相应pH值的缓冲液。
比如你的体系pH值会降到5,你就做一个pH=5的缓冲液看看其对细菌的杀伤情况,当做阴性对照
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
6楼2013-10-23 22:32:02
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