应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 拟南芥kana抗性筛选
51/1返回列表
查看: 6082  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

as023

银虫 (小有名气)

[求助] 拟南芥kana抗性筛选

我想进行拟南芥筛选，抗性为kana,,具体操作步骤是怎么的呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-18 23:13:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:53:30
楼上说的都切中要害，就是在萌芽的普通培养基中加上kan筛选，转基因的种子有抗性，可以在上面生长，而普通种子则慢慢发黄死去，如此达到筛选转基因苗的目的！
无论从时间上还是工作量方面讲，转基因的种子得来都不易，所以有几个细节需要注意！
1）拟南芥比较脆弱，如果条件摸索不好，种植比较难以成功，所以建议楼主筛选的时候分批次种植，留点种子备用，以防万一！
2）培养基萌芽特别容易污染，而抗性板筛选相对而言生长周期长点，所以避免污染是至关重要的。所以建议楼主这样：
     拟南芥种子收取时尽量只收取果荚（全部装塑料袋再收种子容易有杂质，分不开），精心处理，去除杂志；
     备份一些种子分批种植，种植的种子先用70%-75%酒精浸泡消毒10分钟左右，期间间断性地颠倒。倒去酒精，改用升汞或者20%漂渍液（普通种植此步即可）浸泡消毒10分钟，方法同上。后用灭菌的dd水洗3-5遍；
     超净台内待抗性平板吹干后，用无菌枪头将种子转移至平板上，加几毫升无菌水，小幅度上下左右慢慢晃动，待种子分布较为均匀时抽去一些水，继续晃动，知道达到理想分布，然后抽尽可见水分，超净台内吹干。操作期间切记手在培养基上方晃动，尽可能降低污染的机会！封口膜可口！
     4度冰箱（正着放）春化两天，如有必要，可再次放入超净台吹干，封口膜封口！转入温室培养
     培养期间可增施营养液，适量浇水，避免过干或过湿。经常查看，一看环境温度，二看水分，三看是否有蘑菇蝇或者蚜虫滋生！
祝楼主一切顺利！
赞一下(1人) 回复此楼
特别喜欢家门口开门的瞬间，宝宝那个高兴呀，蹦蹦跳跳，好不热闹！
6楼2013-11-04 20:45:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-19 01:25:40
到含有卡那霉素抗性（10μg/ml）的MS平板，把种子在超净台里消毒，用无菌牙签把转移到平板上，4°C放置2天后放关照培养箱里正置培养约2周，抗性苗可以转到土里继续培养。
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-18 23:39:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

as023

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-18 23:39:39
到含有卡那霉素抗性（10μg/ml）的MS平板，把种子在超净台里消毒，用无菌牙签把转移到平板上，4°C放置2天后放关照培养箱里正置培养约2周，抗性苗可以转到土里继续培养。

因为我想看分离比率，用不用避光呢
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-19 12:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-20 10:00:26
as023: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-10-23 23:03:40
引用回帖:
3楼: Originally posted by as023 at 2013-10-19 12:54:43
因为我想看分离比率，用不用避光呢...

你指什么时候避光？你需要完全暗下培养拟南芥吗？如果你的突变株是光敏感的，需要适当改变光照条件。
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-20 01:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 311求调剂 +13 冬十三 2026-03-15 14/700 2026-03-21 22:10 by peike
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 326求调剂 +4 mlpqaz03 2026-03-15 4/200 2026-03-21 19:10 by ColorlessPI
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸！ 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭