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a840900570

银虫 (初入文坛)

[求助] 怎样从土壤中提取枯草芽孢杆菌,并进行纯化?越详细越好!

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博士生研究生

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+6, 鼓励新虫发帖交流,欢迎常来! 2013-10-18 20:23:06
a840900570: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-18 20:30:52
你想提取什么类型的菌株?
有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌;有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系,故常作选育核苷生产 菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。
大体说一下一般的步骤:
1 查阅文献:了解自己所要提取的枯草芽孢杆菌的生理习性,重点是最合适的生存环境
2 采样 : 在适合枯草芽孢杆菌生长的地方采取土样,均匀的分散的无菌水中
3 繁殖 :取上述悬液中的上清液,稀释,涂布到无菌土壤浸出汁制成的基本培养基的平板上,37℃培养箱中倒置培养24-48(72)小时
4 分离 : 用选择培养基(平板)筛选相应的枯草芽孢杆菌(要选择合适的培养基,这样工作量会小很多)
5 富集 : 将筛选出的枯草芽孢杆菌接种到适合其生长的液体培养基,使其大量繁殖
6 筛选 : 将上述培养液稀释,涂布到相应的鉴别培养基中(选择只适合你要的菌种生长的培养基)培养,比如产α-淀粉酶的菌株,选择只有淀粉做碳源的培养基,不分泌淀粉酶的菌株不能在此培养基上生长
7 鉴定 : 挑取培养基上的单菌落做进一步鉴定,比如营养缺陷型(生长谱法即可)的鉴定等
  大体就这个顺序,希望可以帮到你!
5楼2013-10-18 17:52:12
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
a840900570: 金币+1, ★有帮助 2013-10-18 20:28:05
最简单的就是培养后水浴,然后涂布,枯草芽孢杆菌形成芽孢后耐热,能存活下来,涂平板后挑单菌落做镜检
2楼2013-10-17 11:16:48
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a840900570

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wzq_ing at 2013-10-17 11:16:48
最简单的就是培养后水浴,然后涂布,枯草芽孢杆菌形成芽孢后耐热,能存活下来,涂平板后挑单菌落做镜检

能说说具体的操作方法吗?
3楼2013-10-17 19:01:33
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

送点金币啊,还要普及的答案,配合下
4楼2013-10-18 08:13:38
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