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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 怎样从土壤中提取枯草芽孢杆菌，并进行纯化？越详细越好！
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a840900570

银虫 (初入文坛)

[求助] 怎样从土壤中提取枯草芽孢杆菌，并进行纯化？越详细越好！

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1楼 2013-10-16 20:55:58
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
a840900570: 金币+1, ★有帮助 2013-10-18 20:28:05
最简单的就是培养后水浴，然后涂布，枯草芽孢杆菌形成芽孢后耐热，能存活下来，涂平板后挑单菌落做镜检
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2楼2013-10-17 11:16:48
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a840900570

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wzq_ing at 2013-10-17 11:16:48
最简单的就是培养后水浴，然后涂布，枯草芽孢杆菌形成芽孢后耐热，能存活下来，涂平板后挑单菌落做镜检

能说说具体的操作方法吗？
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3楼2013-10-17 19:01:33
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

送点金币啊，还要普及的答案，配合下
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4楼2013-10-18 08:13:38
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博士生研究生

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+6, 鼓励新虫发帖交流，欢迎常来！ 2013-10-18 20:23:06
a840900570: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-18 20:30:52
你想提取什么类型的菌株？
有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌；有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系，故常作选育核苷生产 菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。
大体说一下一般的步骤：
1 查阅文献：了解自己所要提取的枯草芽孢杆菌的生理习性，重点是最合适的生存环境
2 采样 ： 在适合枯草芽孢杆菌生长的地方采取土样，均匀的分散的无菌水中
3 繁殖 ：取上述悬液中的上清液，稀释，涂布到无菌土壤浸出汁制成的基本培养基的平板上，37℃培养箱中倒置培养24-48（72）小时
4 分离 ： 用选择培养基（平板）筛选相应的枯草芽孢杆菌（要选择合适的培养基，这样工作量会小很多）
5 富集 ： 将筛选出的枯草芽孢杆菌接种到适合其生长的液体培养基，使其大量繁殖
6 筛选 ： 将上述培养液稀释，涂布到相应的鉴别培养基中（选择只适合你要的菌种生长的培养基）培养，比如产α-淀粉酶的菌株，选择只有淀粉做碳源的培养基，不分泌淀粉酶的菌株不能在此培养基上生长
7 鉴定 ： 挑取培养基上的单菌落做进一步鉴定，比如营养缺陷型（生长谱法即可）的鉴定等
  大体就这个顺序，希望可以帮到你！
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5楼2013-10-18 17:52:12
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a840900570

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 博士生研究生 at 2013-10-18 17:52:12
你想提取什么类型的菌株？
有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌；有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系，故常作选育核苷生产 菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。
大体说一下一般的步骤：
1 查阅文献：了解 ...

6楼2013-10-18 20:30:26
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