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dongbaiju

银虫 (小有名气)

[求助] 怎样避免盐析?

蛋白质在中性盐溶液中析出沉淀,在PBS中也应该差不多。
我用的是一种蛋白质纳米纤维,在1XPBS中溶液沉淀,想问问有没有改进的办法让其
在溶液中稳定24h或者更长的时间
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dongbaiju: 金币+10 2013-10-16 16:10:15
dongbaiju: 金币+20 2013-10-16 16:30:41
1.溶于水吗?2.高离子强度盐析?3.DMSO之类的能用不?吐温80之类的表面活性剂试试。
不知道LZ的蛋白纤维形成的条件,靠疏水作用还是离子键氢键形成纤维?很多纳米材料形成后稳定性不好,有些是分子本身决定的,稳定分散了也行不成纳米纤维了,LZ的蛋白单体什么条件下稳定?组装成纳米纤维的过程中环境的改变。
2楼2013-10-16 16:09:45
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dongbaiju

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-16 16:09:45
1.溶于水吗?2.高离子强度盐析?3.DMSO之类的能用不?吐温80之类的表面活性剂试试。
不知道LZ的蛋白纤维形成的条件,靠疏水作用还是离子键氢键形成纤维?很多纳米材料形成后稳定性不好,有些是分子本身决定的,稳定 ...

溶于水,在水中稳定性很好。我想用一些生物相容性好的表面活性剂,有推荐吗?呵呵。
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3楼2013-10-16 16:11:47
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hl16010921

木虫 (正式写手)


yqbter: 金币+1, 欢迎应助。 2013-10-16 17:12:39
1.建议先试试DMSO,毕竟DMSO的用量最大可以调到5%,而且毒性相对小些。
2.溶于水,但离子强度稍高就组装,不知道加少量BSA能不能影响纳米纤维的形成。用到细胞上的话,建议试试血清或含血清培养基,毕竟最终用在细胞上。
3.试试碳酸盐体系D-hanks液或hanks液,毕竟培养基中的磷酸盐浓度不高。而磷酸基团对电荷的影响更大。
4楼2013-10-16 16:22:46
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dongbaiju

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-16 16:22:46
1.建议先试试DMSO,毕竟DMSO的用量最大可以调到5%,而且毒性相对小些。
2.溶于水,但离子强度稍高就组装,不知道加少量BSA能不能影响纳米纤维的形成。用到细胞上的话,建议试试血清或含血清培养基,毕竟最终用在细 ...

我的是把已经生成的纳米纤维加入到培养基中养细胞,
这些建议都很好,我会抓紧试试的
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5楼2013-10-16 16:30:31
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dongbaiju

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-16 16:22:46
1.建议先试试DMSO,毕竟DMSO的用量最大可以调到5%,而且毒性相对小些。
2.溶于水,但离子强度稍高就组装,不知道加少量BSA能不能影响纳米纤维的形成。用到细胞上的话,建议试试血清或含血清培养基,毕竟最终用在细 ...

我查了下D-hanks液或hanks液里面也有磷酸集基团呀
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6楼2013-10-16 16:51:20
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hl16010921

木虫 (正式写手)

HANKs的磷酸盐浓度较PBS低,可能会好些。光记得hanks的主要缓冲对是碳酸盐体系了,忘记了非主要体系的磷酸盐。实在不行就得趁没沉出来就加到细胞培养基里,再有就是溶于培养基超声,离心取上清,这是对溶解度不好的聚集材料有时这么干,浓度不准有所下降,有些纳米材料就是超声弄出来的,但不知道你的适不适用。
7楼2013-10-16 19:58:20
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