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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 怎样避免盐析？
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dongbaiju

银虫 (小有名气)

[求助] 怎样避免盐析？

蛋白质在中性盐溶液中析出沉淀，在PBS中也应该差不多。
我用的是一种蛋白质纳米纤维，在1XPBS中溶液沉淀，想问问有没有改进的办法让其
在溶液中稳定24h或者更长的时间
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1楼 2013-10-16 15:56:23
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dongbaiju: 金币+10 2013-10-16 16:10:15
dongbaiju: 金币+20 2013-10-16 16:30:41
1.溶于水吗？2.高离子强度盐析？3.DMSO之类的能用不？吐温80之类的表面活性剂试试。
不知道LZ的蛋白纤维形成的条件，靠疏水作用还是离子键氢键形成纤维？很多纳米材料形成后稳定性不好，有些是分子本身决定的，稳定分散了也行不成纳米纤维了，LZ的蛋白单体什么条件下稳定?组装成纳米纤维的过程中环境的改变。
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2楼2013-10-16 16:09:45
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dongbaiju

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-16 16:09:45
1.溶于水吗？2.高离子强度盐析？3.DMSO之类的能用不？吐温80之类的表面活性剂试试。
不知道LZ的蛋白纤维形成的条件，靠疏水作用还是离子键氢键形成纤维？很多纳米材料形成后稳定性不好，有些是分子本身决定的，稳定 ...

溶于水，在水中稳定性很好。我想用一些生物相容性好的表面活性剂，有推荐吗?呵呵。
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3楼2013-10-16 16:11:47
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hl16010921

木虫 (正式写手)
★
yqbter: 金币+1, 欢迎应助。 2013-10-16 17:12:39
1.建议先试试DMSO，毕竟DMSO的用量最大可以调到5%，而且毒性相对小些。
2.溶于水，但离子强度稍高就组装，不知道加少量BSA能不能影响纳米纤维的形成。用到细胞上的话，建议试试血清或含血清培养基，毕竟最终用在细胞上。
3.试试碳酸盐体系D-hanks液或hanks液，毕竟培养基中的磷酸盐浓度不高。而磷酸基团对电荷的影响更大。
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4楼2013-10-16 16:22:46
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dongbaiju

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-16 16:22:46
1.建议先试试DMSO，毕竟DMSO的用量最大可以调到5%，而且毒性相对小些。
2.溶于水，但离子强度稍高就组装，不知道加少量BSA能不能影响纳米纤维的形成。用到细胞上的话，建议试试血清或含血清培养基，毕竟最终用在细 ...

我的是把已经生成的纳米纤维加入到培养基中养细胞，
这些建议都很好，我会抓紧试试的
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5楼2013-10-16 16:30:31
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dongbaiju

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-16 16:22:46
1.建议先试试DMSO，毕竟DMSO的用量最大可以调到5%，而且毒性相对小些。
2.溶于水，但离子强度稍高就组装，不知道加少量BSA能不能影响纳米纤维的形成。用到细胞上的话，建议试试血清或含血清培养基，毕竟最终用在细 ...

我查了下D-hanks液或hanks液里面也有磷酸集基团呀
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6楼2013-10-16 16:51:20
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hl16010921

木虫 (正式写手)
HANKs的磷酸盐浓度较PBS低，可能会好些。光记得hanks的主要缓冲对是碳酸盐体系了，忘记了非主要体系的磷酸盐。实在不行就得趁没沉出来就加到细胞培养基里，再有就是溶于培养基超声，离心取上清，这是对溶解度不好的聚集材料有时这么干，浓度不准有所下降，有些纳米材料就是超声弄出来的，但不知道你的适不适用。
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7楼2013-10-16 19:58:20
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