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DGGE银染问题
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doubleping
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DGGE银染问题
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我的DGGE胶用银染方法染色,背景很干净,但是泳道颜色很深,有什么方法可以让用淡颜色淡点吗?
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1楼
2013-10-13 09:11:26
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【答案】应助回帖
引用回帖:
12楼
:
Originally posted by
doubleping
at 2014-02-28 20:54:17
试剂配方
10% HAC 50ml HAC(冰醋酸)+450ml dH2O
1%硝酸 5ml 硝酸+495ml dH2O
0.2%硝酸银 1g硝酸银+500ml dH2O+500ul甲醛
2.5%碳酸钠 12.5g碳酸钠+250ul甲醛 ...
谢谢!我发现pcr产物的质量对后面DGGE影响挺大的,比如说-pcr产物电泳时显示的微弱的非特异性产物,不知楼主是否做过相关方面的摸索?
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13楼
2014-03-01 09:30:33
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lhf903
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★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答
2013-10-13 19:39:02
泳道颜色深可能是前期PCR的原因,出现非特异扩增~
如果不是,可能是染色出现问题,可能是银染之后水洗的时间不够~
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2楼
2013-10-13 10:52:32
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doubleping
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2楼
:
Originally posted by
lhf903
at 2013-10-13 10:52:32
泳道颜色深可能是前期PCR的原因,出现非特异扩增~
如果不是,可能是染色出现问题,可能是银染之后水洗的时间不够~
银染后水洗六次了,还是一样,可能是产物问题,只是不知道该怎么解决?有什么办法吗?
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3楼
2013-10-14 18:25:58
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lhf903
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2013-10-14 20:50:27
可以试试用PCR产物纯化试剂盒,上样前在按一定比例混和loading buffer
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4楼
2013-10-14 19:01:45
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