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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » ＤＧＧＥ银染问题
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doubleping

新虫 (小有名气)

[求助] ＤＧＧＥ银染问题 已有1人参与

我的ＤＧＧＥ胶用银染方法染色，背景很干净，但是泳道颜色很深，有什么方法可以让用淡颜色淡点吗？
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1楼 2013-10-13 09:11:26
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爱吃鱼l

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by doubleping at 2014-02-28 20:54:17
试剂配方
10% HAC             50ml HAC（冰醋酸）+450ml dH2O
1%硝酸               5ml 硝酸+495ml dH2O
0.2%硝酸银            1g硝酸银+500ml dH2O+500ul甲醛
2.5%碳酸钠           12.5g碳酸钠+250ul甲醛 ...

谢谢！我发现pcr产物的质量对后面DGGE影响挺大的，比如说-pcr产物电泳时显示的微弱的非特异性产物，不知楼主是否做过相关方面的摸索？

[ 发自小木虫客户端 ]
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13楼2014-03-01 09:30:33
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-13 19:39:02
泳道颜色深可能是前期PCR的原因，出现非特异扩增~
如果不是，可能是染色出现问题，可能是银染之后水洗的时间不够~
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2楼2013-10-13 10:52:32
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doubleping

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lhf903 at 2013-10-13 10:52:32
泳道颜色深可能是前期PCR的原因，出现非特异扩增~
如果不是，可能是染色出现问题，可能是银染之后水洗的时间不够~

银染后水洗六次了，还是一样，可能是产物问题，只是不知道该怎么解决？有什么办法吗？
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3楼2013-10-14 18:25:58
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-14 20:50:27
可以试试用PCR产物纯化试剂盒，上样前在按一定比例混和loading buffer
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4楼2013-10-14 19:01:45
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