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tsf741014

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物设计

找公司设计了引物,各设计了两个,对这块一点不懂,谁能帮看下特异性什么的,看能不能用?

Generic primers: PPAR γ
Orientation        Start        Len        Tm        GC%        Any
lFORWARD        642        21        58.79        42.86        3.00
REVERSE                       732        22        59.38        45.45        2.00
Primer Seq
TGCCAAGCATTTGTATGACTC       
TTTGTCTGTCGTCTTTCCTGTC               
Orientation        Start        Len        Tm        GC%        Any
FORWARD        242        20        58.38        55.00        3.00       
REVERSE                       345        19        59.98        52.63        2.00
Primer Seq
AGCCTCCTTCTCCTCCCTAT
CCCACACACACGACATTCA
Generic primers: SOD
Orientation        Start        Len        Tm        GC%        Any
FORWARD        271        20        60.25        55.00        3.00
REVERSE                        427        21        59.18        47.62        3.00       
Primer Seq
AAGGGAGGAGTGGCAGAAGT
GAGGTCCAGCATTTCCAGTTA
Orientation        Start        Len        Tm        GC%        Any
FORWARD        54        19        59.20        57.89        2.00
REVERSE                        171        20        59.39        45.00        3.00
Primer Seq
GGTCATCCACTTCCAGCAG
CCCATTTGTGTTGTCTCCAA
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yang0071

木虫 (职业作家)

你的引物用于做什么的
2楼2013-10-12 15:27:00
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tsf741014

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2013-10-12 15:27:00
你的引物用于做什么的

荧光定量PCR,测mRNA表达
3楼2013-10-12 15:29:27
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-14 08:26:00
你针对的原始序列是什么
一般来说 是可以用的
你既然在公司做引物设计,索性荧光定量PCR也在公司做的了
4楼2013-10-12 15:39:06
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tsf741014

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yang0071 at 2013-10-12 15:39:06
你针对的原始序列是什么
一般来说 是可以用的
你既然在公司做引物设计,索性荧光定量PCR也在公司做的了

引物要公司合成,下面的就我自己做了,他给分别设计了两个,哪个更好些?
PPAR γ的原始序列
ORIGIN      
        1 attacaatgg ttgacacaga aatgccgttt tggcccgtta attttggaat tagcccagtg
       61 gatctgtctg cgatggatga tcatatgcat tcctttgaca taaagccatt taccactgtt
      121 gatttttcaa gcatttcttc accacactat gaagatatac ctcttggaag agctgatcaa
      181 acaagcattg attataaata tgatatcaag ctccaggatt gccaaagtgc aatcaaaatg
      241 gagcctcctt ctcctcccta tttttctgaa aaagtgcagt tatacaataa acctcacgag
      301 gagtcttcca actcacttat ggctattgaa tgtcgtgtgt gtggggacaa ggcctctgga
      361 tttcattatg gagtgcatgc atgtgaaggt tgtaagggct tttttcgaag aacaatcaga
      421 ttaaagctta tttatgatag gtgtgacctt aattgtcgca tccataagaa aagcagaaat
      481 aagtgtcaat actgcagatt tcagaaatgt cttgcagttg gaatgtcaca taatgccatc
      541 aggtttgggc gaatgccaca agcggagaag gagaagctct tggcagagat ttccagcgac
      601 atcgaccagt taaatcctga atctgctgat ctgcgagcgc ttgccaagca tttgtatgac
      661 tcatacataa agtccttccc gctgaccaaa gccaaggcaa gggcgatctt gacaggaaag
      721 acgacagaca aatcaccatt tgttatttat gacatgaact ctttaaggat gggagaagat
      781 cagatcaagt gtaagcatgc atcaccactg caggaacaga acaaagaagt agcaattcgc
      841 attttccagc gatgtcagtt tcgctctgtg gaggcagtgc aggagattac agaatttgcg
      901 aagaacattc caggttttgt gaatcttgac ctgaatgatc aggtaaccct cctgaaatat
      961 ggtgtccatg agatcatata tactctcctg gcttctctca tgaataaaga tggagttctt
     1021 atatctgatg gacaaggatt catgacacgg gagtttctga agagtctgag aaaacctttt
     1081 tgtgacttta tggagcccaa gtttgagttt gctgtgaagt tcaacgcact ggaattagat
     1141 gacagtgacc tggcaatatt tatagctgtc attatactaa gtggagatcg cccaggtttg
     1201 ttaaatgtga agcccattga agatatacaa gataatctgt tgcaagcttt ggagctccag
     1261 ctaaagctga atcatccaga gtcatcacag ctgtttgcaa aattgcttca gaaaatgacg
     1321 gacctcagac aaattgtaac ggaacacgtg cagctgttgc aaataataaa gaaaacggaa
     1381 acagatatga gtcttcatcc actcctacaa gaaatctata aagacttata ttaatggcga
     1441 tagtagttct tatcctctga cataatgtat gttcttcaga ttgcactatt tctttgagag
     1501 aaaactttgc atacttaaga aattactgtg aaacagcatt taaagaagag agagcttagt
     1561 atagtagatc tattttatgc atattgttta taaagacaca tttacaattt acttttaata
     1621 ttaataatat ctatatcatg aaattgttgg cagtattttc agaattaatt tttttaacta
     1681 tcttatttcc taaaattgct tgtccagtat gattgatgct tgcttcactg aggttggtta
     1741 agcatgcagt taaattttca acttaaaaat aaaaatcttt ctccttaaac atttctaggg
     1801 aaacatttta agtattatgt ttgattctgt gctcccaagg cagcggcaaa ataacaatga
     1861 agttgaatca ttgattagca caacttcaca caaggactca aaagggaaaa gttagacatg
     1921 tcaggtctag tagttgttcc taccataatc aattttcaaa ctgatagagt tctgtaacga
     1981 ggacttttca tacgtatgaa ttaggccatc atttatgggc actcaaaaaa ttgactccat
     2041 ttcaagcatt aattgaggaa tatacactgc tcatcacttt cttagagat
SOD的原始序列
ORIGIN      
        1 atggcgacgc tgaaggccgt gtgcgtgatg aagggggacg cccccgtgga gggggtcatc
       61 cacttccagc agcaggggag cgggccagta aaggttactg gaaaaattac cggcttgtct
      121 gatggagatc atggcttcca tgtgcatgaa tttggagaca acacaaatgg gtgtaccagc
      181 gcaggtgctc actttaatcc tgaaggcaag cagcacggtg gaccaaaaga tgcagatagg
      241 cacgtgggtg acctcggcaa tgtgactgca aagggaggag tggcagaagt agaaatagaa
      301 gattctgtca tttctcttac cggaccacac tgcatcattg gccgtaccat ggtggtccat
      361 gcaaaaagtg atgacctggg tagaggggga gataatgaga gcaaactaac tggaaatgct
      421 ggacctcgtt tagcttgtgg tgtaattgga atagccaagt gctaaccgtt gtacctgaaa
      481 tgcttaagat ggcagtggga aatgagctgt atttcattgt gattgctgta cttgctcttc
      541 cgtgtgcaag caaaagattt atcacttaat ctcattacta ctctgctgtc ttgagtatca
      601 gtttaactgg tgaatactga cataatttcg tattatgtat attgcaatta aagtgttact
      661 aatgga
5楼2013-10-12 16:41:08
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tsf741014

新虫 (初入文坛)

没人知道么?
6楼2013-10-13 10:55:26
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tsf741014

新虫 (初入文坛)

再自己顶一下
7楼2013-10-13 18:18:48
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zhujun6701

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是公司设计的,完全可以用。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2013-10-14 06:20:46
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lyqifeih

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-15 10:53:05
现在的Taq酶 效率很高, 用beacon designer, primer express, oligo 7等设计出来的 引物和探针 都很好。不要过于担心,我经常用primer 5设计 taqman探针 ARMS 引物 效果都很好!
刚进入神经生物和电生理
9楼2013-10-14 08:26:11
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tsf741014

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by lyqifeih at 2013-10-14 08:26:11
现在的Taq酶 效率很高, 用beacon designer, primer express, oligo 7等设计出来的 引物和探针 都很好。不要过于担心,我经常用primer 5设计 taqman探针 ARMS 引物 效果都很好!

噢噢,谢谢
10楼2013-10-14 09:37:09
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