| 查看: 2073 | 回复: 6 | ||
静安jingan铁杆木虫 (职业作家)
|
[求助]
酵母平板
|
| 刚做了转化，用的是毕赤酵母，涂板后3天长出来的菌落so奇怪，以至于我就不淡定了，平板是倒置的，结果菌落是细丝状的垂直于平板生长，也是白色的，当然平板上也有那种很保守形态的酵母菌落，目前就是想知道这种到底是不是酵母，这个平板上的单克隆能不能用呢 |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有168人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
2楼2013-10-08 14:48:02
静安jingan
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 86 (初中生)
- 贵宾: 0.932
- 金币: 9295.7
- 散金: 2894
- 红花: 43
- 沙发: 28
- 帖子: 4233
- 在线: 1412.1小时
- 虫号: 2005883
- 注册: 2012-09-16
- 性别: MM
- 专业: 免疫相关疾病其他科学问题
3楼2013-10-08 14:54:12
4楼2013-10-08 17:57:20
cuicchao
金虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1263.7
- 散金: 100
- 帖子: 359
- 在线: 490.2小时
- 虫号: 1572195
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
5楼2013-10-08 22:30:00
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
静安jingan: 金币+7, ★★★很有帮助 2013-10-09 09:33:24
静安jingan: 金币+7, ★★★很有帮助 2013-10-09 09:33:24
|
高拷贝筛选就是利用抗生素进行梯度筛选。pPIC3.5K/pPIC9K等载体用G418梯度平板筛选，pPICZα系列的载体用博来霉素（Zeocin）筛选，根据楼主的描述所用抗生素会见光分解，那么猜测楼主所用的抗生素应该是Zeocin。方法是先将所有的转化子在96孔板上连续转接培养三次，每次培养1-2天，使菌体浓度渐趋一致，在分别点接于不同抗生素浓度的平板上（取1ul），浓度梯度可以设置为：0,0.25,0.5,1.0,2.0mg/ml。然后挑选在最高抗生素浓度平板上生长的菌落，培养后提取基因组利用AOX1通用引物或AOX1 3‘下游引物和α-factor组合引物或者是用目的基因特异性引物鉴定筛选到的转化子。 |
6楼2013-10-09 08:24:40
静安jingan
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 86 (初中生)
- 贵宾: 0.932
- 金币: 9295.7
- 散金: 2894
- 红花: 43
- 沙发: 28
- 帖子: 4233
- 在线: 1412.1小时
- 虫号: 2005883
- 注册: 2012-09-16
- 性别: MM
- 专业: 免疫相关疾病其他科学问题
7楼2013-10-09 09:32:16
