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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求解：纯化蛋白跑SDS-PAGE，没有条带
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715097730

铜虫 (小有名气)
多谢各位，已经做出来了，还是样品浓度太低，我把样品加过lodding后煮沸浓缩了再跑就有条带了
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11楼2013-10-11 15:44:01
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牛焕杰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

浓度太低了吧，你可以计算一下，300ug/ml，上样10ul样品，样品中只有3微克蛋白，这3微克还包括杂蛋白和你要的蛋白，考马斯亮蓝染色的灵敏度是0.1微克
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12楼2014-10-20 21:15:20
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嗜睡狂魔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 715097730 at 2013-10-11 15:44:01
多谢各位，已经做出来了，还是样品浓度太低，我把样品加过lodding后煮沸浓缩了再跑就有条带了

煮沸怎么浓缩呢？遇到同样问题
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13楼2015-06-26 19:44:10
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之子于归110

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by felling_123 at 2013-10-06 15:26:31
建议增加样品的浓度（该样品浓度的5~10倍），因为你的样品“300ug/ml“不一定是实际浓度，某些蛋白浓度测定方法对低浓度蛋白测定误差大，低浓度的样品是看不见条带的。祝你好运

你好 ，我做蛋白纯化用硫酸铵分级沉淀。百分之30的上清有酶活，沉淀没有。但是SDS上清液无条带，但是沉淀有明显条带

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14楼2022-07-04 09:39:29
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