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wangzunchen

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[交流] 大孔树脂和聚酰胺的使用

本人现在在使用大孔树脂和聚酰胺来纯化一种苷类物质，现在有几个问题需要请教
1 大孔吸附树脂和聚酰胺与提取物的比例问题，1g提取物需要用多少g大孔或者聚酰胺啊。
2 提取物溶液上样浓度问题，树脂正好能吸附1g提取物的前提下，1g提取物溶解在10ml溶剂中和20ml中上样效果一样吗，20ml时上样回吸附完全吗，
3 树脂正好能吸附提取物的前提下，装柱的径高比对吸附影响大不大。
4 加入10%乙醇可以洗脱杂质，之前还需要纯水洗柱吗
希望各位帮助一下，回答好的必有重谢。
金币十一回来后发放

[ Last edited by wangzunchen on 2013-9-30 at 14:08 ]

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1楼2013-09-30 13:44:00

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wangzunchen

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by hyf110 at 2013-09-30 14:32:30
1.不同型号的大孔吸附树脂，由于其极性、孔径、比表面积等因素的差别，其吸附量和吸附率是不同的，同时，和你所说的提取物中苷类物质的含量以及提取物的粗体程度有关。但是一般上样量和树脂量比为1:6-1:10就能达到吸 ...

不好意思，想多发给你金币的，但每次只能10个，
对于问题4，也就是说水洗是必不可少的，如果我只需要30%组分，那么后面的色谱柱处理可以用乙醇直接洗脱吗

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5楼2013-09-30 15:24:20

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hyf110

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wangzunchen: 金币+10 2013-09-30 15:19:26
xiaoxiao270: 金币+1 2013-10-01 08:33:00

1.不同型号的大孔吸附树脂，由于其极性、孔径、比表面积等因素的差别，其吸附量和吸附率是不同的，同时，和你所说的提取物中苷类物质的含量以及提取物的粗体程度有关。但是一般上样量和树脂量比为1:6-1:10就能达到吸附饱和。建议大量处理样品之前做预实验，先计算吸附量和吸附率，以及洗脱量、洗脱率等。聚酰胺相似。

2。如果1g提取物能溶解在10ml溶剂中，那么绝不用20ml溶解，因为溶剂太多泄露曲线会更早或提前出来。影响样品的吸附。

3.径高比和柱效是成正比的，柱子越细越长，塔板数越多，柱效越高，但洗脱流速相应越慢，洗脱时间越长，死吸附也会越严重。对大孔树脂来说，毕竟是一个粗分离过程，建议用一较粗的柱子进行分离。

4.再用乙醇洗脱之前，最好用纯水多冲几个柱体积，尽量除掉大极性的东西，尤其像糖类，会对后面的乙醇洗脱有无限大的好处。

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2楼2013-09-30 14:32:30

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