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[交流]
大孔树脂和聚酰胺的使用
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本人现在在使用大孔树脂和聚酰胺来纯化一种苷类物质,现在有几个问题需要请教 1 大孔吸附树脂和聚酰胺与提取物的比例问题,1g提取物需要用多少g大孔或者聚酰胺啊。 2 提取物溶液上样浓度问题,树脂正好能吸附1g提取物的前提下,1g提取物溶解在10ml溶剂中和20ml中上样效果一样吗,20ml时上样回吸附完全吗, 3 树脂正好能吸附提取物的前提下,装柱的径高比对吸附影响大不大。 4 加入10%乙醇可以洗脱杂质,之前还需要纯水洗柱吗 希望各位帮助一下,回答好的必有重谢。 金币十一回来后发放 [ Last edited by wangzunchen on 2013-9-30 at 14:08 ] |
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wangzunchen: 金币+10 2013-09-30 15:19:26
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1.不同型号的大孔吸附树脂,由于其极性、孔径、比表面积等因素的差别,其吸附量和吸附率是不同的,同时,和你所说的提取物中苷类物质的含量以及提取物的粗体程度有关。但是一般上样量和树脂量比为1:6-1:10就能达到吸附饱和。建议大量处理样品之前做预实验,先计算吸附量和吸附率,以及洗脱量、洗脱率等。聚酰胺相似。 2。如果1g提取物能溶解在10ml溶剂中,那么绝不用20ml溶解,因为溶剂太多泄露曲线会更早或提前出来。影响样品的吸附。 3.径高比和柱效是成正比的,柱子越细越长,塔板数越多,柱效越高,但洗脱流速相应越慢,洗脱时间越长,死吸附也会越严重。对大孔树脂来说,毕竟是一个粗分离过程,建议用一较粗的柱子进行分离。 4.再用乙醇洗脱之前,最好用纯水多冲几个柱体积,尽量除掉大极性的东西,尤其像糖类,会对后面的乙醇洗脱有无限大的好处。 |
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