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echochen1017

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助有没有耐高温的DNA ligase

求助大神，是否知道有没有耐高温的DNA连接酶能在PCR每次循环结束后立刻就能连接的，求获得方式！救急！
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1楼 2013-09-27 15:08:12
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-28 02:04:19
T7ligase, 合成大片段DNA的时候用的就是这个连接酶吧
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2013-09-27 21:47:19
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echochen1017

新虫 (初入文坛)
那请问有没有NAD+-dependent 的DNA ligase呢？也是耐高温的，能在每次PCR循环后立马连接上的那种
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3楼2013-09-29 16:35:14
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echochen1017

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2013-09-27 21:47:19
T7ligase, 合成大片段DNA的时候用的就是这个连接酶吧

这个T7 DNA ligase是连接双链DNA的粘性末端，我想找能连接单链DNA的3‘缺刻和5’的耐高温连接酶，不知道您知不知道有哪种是呢
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4楼2013-09-29 16:38:40
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2013-09-30 17:56:19
首推NEB的9°N™ DNA 连接酶  ,另外是，Taq DNA 连接酶。
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为什么
5楼2013-09-29 18:29:51
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547star

木虫 (著名写手)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-30 17:56:28
9°N™ DNA 连接酶要求互补的粘端有12nt长以上;Taq DNA 连接酶在耐高温和在高温的活性方面，比9°N™ DNA 连接酶稍差一些。具体情况搜索资料确认吧。
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为什么
6楼2013-09-29 18:36:15
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ndsc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-30 17:56:37
构建talen载体么？盒子里带啊
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7楼2013-09-30 16:01:20
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