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echochen1017

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助有没有耐高温的DNA ligase

求助大神,是否知道有没有耐高温的DNA连接酶能在PCR每次循环结束后立刻就能连接的,求获得方式!救急!
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-28 02:04:19
T7ligase, 合成大片段DNA的时候用的就是这个连接酶吧
行至水穷处,坐看云起时
2楼2013-09-27 21:47:19
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echochen1017

新虫 (初入文坛)

那请问有没有NAD+-dependent 的DNA ligase呢?也是耐高温的,能在每次PCR循环后立马连接上的那种
3楼2013-09-29 16:35:14
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echochen1017

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2013-09-27 21:47:19
T7ligase, 合成大片段DNA的时候用的就是这个连接酶吧

这个T7 DNA ligase是连接双链DNA的粘性末端,我想找能连接单链DNA的3‘缺刻和5’的耐高温连接酶,不知道您知不知道有哪种是呢
4楼2013-09-29 16:38:40
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2013-09-30 17:56:19
首推NEB的9°N™ DNA 连接酶  ,另外是,Taq DNA 连接酶。
为什么
5楼2013-09-29 18:29:51
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547star

木虫 (著名写手)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-30 17:56:28
9°N™ DNA 连接酶要求互补的粘端有12nt长以上;Taq DNA 连接酶在耐高温和在高温的活性方面,比9°N™ DNA 连接酶稍差一些。具体情况搜索资料确认吧。
为什么
6楼2013-09-29 18:36:15
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ndsc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-30 17:56:37
构建talen载体么?盒子里带啊
7楼2013-09-30 16:01:20
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