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sheepdawn

木虫 (小有名气)

[求助] 关于药物的DMSO溶液对细菌生长影响的问题

大家好,我想请教一个问题:
    我的目的是把一种药物(CAS:106983-30-6)用DMSO溶解之后,配成50mM的储液,然后加到菌液里面,让其终浓度为100μM,但是我发现药物又析出来了,漂浮在培液表面,最后给培液里面加了两滴吐温20,药物才基本溶解。因为我加这个药物是想看它对细菌一些生理行为的影响,而不是杀菌或者抑菌作用,但是加药的和空白(什么都不加)相比,加了药物的对细菌的生长影响挺大的,但是不同药物浓度之间差别到不太大,所以我感觉是DMSO对细菌产生抑制作用了。之前查了文献,说DMSO终浓度一般不要超过0.1%,也有人说不超过1%,我的浓度是0.2%。所以不知道有什么方法,既能保证药物充分溶解,又能把溶剂对细菌的影响降到最低?我的药物要是在配成100mM浓度的储液的话,溶解度就不好了,所以用的50mM。
    此外,不知道用甲醇、DMF或者其他什么溶剂对细胞的毒性怎么样,比较着急,希望大家指教!!!
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-09-28 13:08:39
不同物种对有机试剂的耐受性不同,你可以用无药物的有机溶剂作为对照,再比较药物的作用。
2楼2013-09-28 04:24:51
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sheepdawn

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-28 04:24:51
不同物种对有机试剂的耐受性不同,你可以用无药物的有机溶剂作为对照,再比较药物的作用。

嗯,我试了一下,DMSO为0.1%时,对我的细菌生长都有明显的抑制作用,本来还想让有机溶剂对细菌生长的影响降到最低,没想到我的细菌这么不耐受。那只能把只加有机溶剂的作为对照组来看药物的作用了。
3楼2013-09-30 09:24:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by sheepdawn at 2013-09-30 09:24:59
嗯,我试了一下,DMSO为0.1%时,对我的细菌生长都有明显的抑制作用,本来还想让有机溶剂对细菌生长的影响降到最低,没想到我的细菌这么不耐受。那只能把只加有机溶剂的作为对照组来看药物的作用了。...

你的这种情况只能尽量把母液配制得浓度高一些。这样加入的DMSO体积会减小,溶剂的效应会减弱。或者查一下药物是否可以溶解在其它溶剂里,再做一下那些溶剂对菌的影响是否比DMSO小。
4楼2013-10-01 01:26:34
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sheepdawn

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-01 01:26:34
你的这种情况只能尽量把母液配制得浓度高一些。这样加入的DMSO体积会减小,溶剂的效应会减弱。或者查一下药物是否可以溶解在其它溶剂里,再做一下那些溶剂对菌的影响是否比DMSO小。...

嗯,后面我又做了0.1%和0.05%DMSO,但和什么都不加的空白相比,对细菌正常生长仍有明显的抑制作用,但是做了0.1%的甲醇、乙腈、丙酮,发现和空白对照相比差别不是很大,所以不打算用DMSO了,虽然文献上看到很多的确都是DMSO溶掉的,但我自己做感觉DMSO干扰太大了。我的母液我配的200mM的,最后的终浓度最高用的100μM,我觉得应该差不多,因为有机溶剂溶解之后,但是药物加到培液里又会析出来,我同时还加了0.1%-0.2%的吐温-20,药物才能溶解的比较好。
5楼2013-10-02 16:36:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
sheepdawn: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-10-03 21:58:56
引用回帖:
5楼: Originally posted by sheepdawn at 2013-10-02 16:36:28
嗯,后面我又做了0.1%和0.05%DMSO,但和什么都不加的空白相比,对细菌正常生长仍有明显的抑制作用,但是做了0.1%的甲醇、乙腈、丙酮,发现和空白对照相比差别不是很大,所以不打算用DMSO了,虽然文献上看到很多的确 ...

如果你可以用其他溶剂做相同浓度的STOCK,用其他溶剂做。不管如果,还是要做溶剂对照。如果你要加Tween,对照也要加tween.
6楼2013-10-03 01:07:06
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