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微生物次生代谢产物的研究
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小白一枚，问的问题幼稚希望不要被鄙视~~~~~~~ 本人研究方向是天然药物化学，即将做放线菌次生代谢产物的活性研究，想知道次生代谢产物在细胞体内还是培养基中？怎么得到？一般用什么溶剂提取？用什么柱子分离？或者选择原则是什么？ |
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zhang8826857: 金币+3, 鼓励应助 2013-10-29 23:15:04
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| 楼主不会是跨专业吧，看你基本的知识都不会。你说你要做放线菌次生代谢产物的活性研究。首先你要培养放线菌吧，这里设计菌种的特性、菌种的选择，培养基的选择，这些确定了以后就开始将你的菌接到培养基里面，这时候需要优化培养条件。一般情况下产物会存在于发酵液里面（因为微生物产生次级代谢产物就是为了分泌出来，以营造利于自身生长的环境）。其实在实验之前，你还需要知道你想得到的产物的特性，比如分子量大小、极性、溶解性等等。知道了之后你才能选择怎么从发酵液中分离出你想要的东西，液液萃取还是固液萃取等等。提取完之后再根据产物可能的特性进行纯化，最终得到高纯产物。分离原则，越简单越好，越纯越好，分离时带入的杂质越少越好，越便宜越好，对人体无害（比如水）更好。总而言之一句话：微生物发酵就是把菌放到发酵罐里面，给它食物，给它合适的生存环境，让它生长并不断排泄（说白了次级代谢产物就是微生物的粪便）。懂了吧。。。多看书吧 |
7楼2013-09-29 09:20:27
huaqiangliu
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| 关键你的指的活性研究是哪方面，你要建立一个活性检测方法。然后再去定位你的东西实在胞内还是胞外。其实大部分活性产物都是次级代谢产物，有包内的，也有胞外的。比如说吧，大环内酯类抗生素的抗生素一般为胞内产物，糖肽类的抗生素一般为胞外的。胞内产物也好胞外产物也罢。其实提取分离就那么多种方法，溶媒转换，过柱分离，过柱子 正向，反向，离子交换。正向一般用于胞内产物，因为这些东西一般疏水性较强，一般采用硅胶，氧化铝。反向是通用型的，胞内胞外都能用的上一般广义上讲打孔树脂也放在这，还包括反向层析树脂，反向硅胶。水溶性，离子交换用的较多。但是要是想把一个产品分离纯化到很高纯度，学术上用于结构鉴定，工业上用于生产产品，那么就得多种提取分离方法并用，包括最后析晶等等。发酵产品的下游分离纯化需要很多步骤。 |
4楼2013-09-27 21:44:18
yangw107
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huaqiangliu
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