| 查看: 1037 | 回复: 4 | ||
jghu9200木虫 (小有名气)
|
[求助]
Reviewer提的两个问题，求如何回答，如何做？万分感谢
|
|
Reviewer提的两个问题，本人对这个问题有点拿不准，求热心战友帮忙，如何回答？，如何做？万分感谢 Reviewer #2: The authors did address most concerns of the reviewer. However, there is one technical issue which has to be clarified. 1. In the MM section, the authors state that "To ensure that the samples were free of genomic DNA, RNA samples were subjected to a reverse transcription in the absence of the reverse transcriptase. Our results didn't find any genomic DNA contamination." The authors are correct to assume that if there is any contamination with genomic DNA, then there should be amplification in the subsequent PCR. HOWEVER, in case the primer is an exon-intron spanning oligonucleotide and the amplified intron is too long, than this genomic contamination band will not be visible in a 1% agarose gel. I strongly suggest performing another control experiment with contaminated RNA to ensure that the assay performed is sufficient to detect genomic DNA contamination. 3. Which strategy was followed to evaluate real-time PCR experiments? |
回复此楼» 猜你喜欢
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有85人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
-
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 新手求助，有了CIF文件和ICSD卡片，如何用material studio 建立原子结构，万分感谢。
已经有6人回复
- 求一个做摩擦磨损，最好是单颗粒磨损的ansys命令流。（万分感谢）。。
已经有18人回复
- 求助关于UGI反应的几个问题，万分感谢！
已经有11人回复
- 我的电脑开机速度非常的慢，请问该如何解决这一问题？万分感谢
已经有15人回复
- 加个新问题 ACS applied materials & interfaces 达审稿人意见求助
已经有13人回复
- 第一次发SCI，麻烦高人帮我看看这条审稿意见如何回复
已经有19人回复
- 【求助】关于有MATLAB求复杂的目标函数的最优解的问题？万分感谢！
已经有6人回复
2楼2013-09-27 11:21:50
niil
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 35 (小学生)
- 金币: 6673.5
- 红花: 3
- 帖子: 835
- 在线: 233.2小时
- 虫号: 876426
- 注册: 2009-10-18
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-27 15:35:40
jghu9200: 金币+6, ★★★很有帮助 2013-09-28 21:29:16
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-27 15:35:40
jghu9200: 金币+6, ★★★很有帮助 2013-09-28 21:29:16
|
1. 审稿者认为你的实验的对照有问题。你的对照是不加反转录酶，如果有条带的话，就是DNA污染，但是，由于DNA含有内含子，如果内含子长度过长而且你的引物是跨内含子设计的，那么你依旧不能扩出条带了，但是这种情况下依旧会有DNA污染，所以审稿人让你再设计其他的对照实验，以避免这样的问题。或者，如果你有证据证明你的引物不是跨内含子设计的，那么只向审稿人说明这个问题，并在方法里也相应加上说明就行了。 3.是问评估real-time PCR的方法。也就是你用什么方法来在证明你用这这个real-time PCR体系是有效的。一般来说，都是通过预实验绘制标准曲线来评估real-time PCR体系的优劣的。 每对引物在正式试验之前都需要做一个标准曲线，看获得的标准曲线的斜率是否符合标准。 |
3楼2013-09-27 14:00:30
jghu9200
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1754.1
- 散金: 100
- 红花: 6
- 帖子: 90
- 在线: 116.2小时
- 虫号: 288564
- 注册: 2006-10-21
- 性别: GG
- 专业: 脑、脊髓、周围神经损伤及
4楼2013-09-28 21:27:50
jghu9200
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1754.1
- 散金: 100
- 红花: 6
- 帖子: 90
- 在线: 116.2小时
- 虫号: 288564
- 注册: 2006-10-21
- 性别: GG
- 专业: 脑、脊髓、周围神经损伤及
5楼2013-09-28 21:28:38