应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 真菌菌核RNA提取过程中的问题，求高手帮助
101/1返回列表
查看: 2464  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yini4632

铁虫 (初入文坛)

[交流] 真菌菌核RNA提取过程中的问题，求高手帮助 已有5人参与

菌核里有大量的黑色素，用的trizol法提取的，氯仿抽提后的上清不是无色透明的，是褐色的，最后提取的RNA中总有褐色不容物质，depc水溶解，而且260/230在0.7左右，是不是表明有有机杂质，色素类都是一些酚类物质，怀疑是这些色素无法去除，请教高手如何除去这些杂质。单纯提取菌丝的RNA就很好，菌核就不行了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-09-24 21:27:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有色素影响什么？260/230也不是表明有有机杂质
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-25 18:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yini4632

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2013-09-25 18:17:07
有色素影响什么？260/230也不是表明有有机杂质

有人说上清褐色是由于多酚氧化形成的，会严重影响RNA提取，而且总觉得最后的粗体RNA中有机杂质多了，影响DNA酶的活性，我同时提取的菌核和菌丝的RNA，总是菌核的DNA即使用DNA酶处理也除不掉，但是菌丝里的DNA就除的很干净，RNA电泳和后期通过设计的内含子两侧引物扩增cDNA都显示没有明显的DNA。用于转录组测序的，RNA质量要求比较严格
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-26 15:05:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yini4632

铁虫 (初入文坛)
自己顶
回复此楼
4楼2013-10-08 16:08:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ndsc

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
劝你小心一点，黑曲霉致癌的哦。。。如果只是做检测的话，可以扩增出结果就好，不用在意小结，要结果。
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-08 17:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huayueyang

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
买个商品化的专门针对真菌RNA提取试剂盒是最好的。
赞一下 回复此楼
坚持！
6楼2013-10-16 22:48:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yini4632

铁虫 (初入文坛)
尝试用PVP和巯基乙醇加入到trizol中很好的提取到了RNA（反转录CDNA扩增结果比较好，没有DNA），但是就是RNA电泳只看见一些5.8s条带，点样孔很亮，怀疑是PVP加入太多，堵塞点样孔（用了没加PVP的提取，有DNA污染，但是点样孔正常）
赞一下 回复此楼
7楼2013-10-31 18:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到了加入氯仿最上层也是黑色的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-03-04 22:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天天ai学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 渊博震天 at 2017-03-04 22:44:09
我也遇到了加入氯仿最上层也是黑色的

加pvp

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
9楼2017-03-06 00:39:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
内容已删除
回复此楼
10楼2017-03-06 07:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yini4632 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-31 01:51 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-31 01:38 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-31 01:26 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-31 01:05 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 15/750 2026-08-31 00:10 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:01 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:50 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:40 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭