应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 真菌菌核RNA提取过程中的问题，求高手帮助
101/1返回列表
查看: 2283  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yini4632

铁虫 (初入文坛)

[交流] 真菌菌核RNA提取过程中的问题，求高手帮助 已有5人参与

菌核里有大量的黑色素，用的trizol法提取的，氯仿抽提后的上清不是无色透明的，是褐色的，最后提取的RNA中总有褐色不容物质，depc水溶解，而且260/230在0.7左右，是不是表明有有机杂质，色素类都是一些酚类物质，怀疑是这些色素无法去除，请教高手如何除去这些杂质。单纯提取菌丝的RNA就很好，菌核就不行了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-09-24 21:27:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有色素影响什么？260/230也不是表明有有机杂质
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-25 18:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yini4632

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Fleaves at 2013-09-25 18:17:07
有色素影响什么？260/230也不是表明有有机杂质

有人说上清褐色是由于多酚氧化形成的，会严重影响RNA提取，而且总觉得最后的粗体RNA中有机杂质多了，影响DNA酶的活性，我同时提取的菌核和菌丝的RNA，总是菌核的DNA即使用DNA酶处理也除不掉，但是菌丝里的DNA就除的很干净，RNA电泳和后期通过设计的内含子两侧引物扩增cDNA都显示没有明显的DNA。用于转录组测序的，RNA质量要求比较严格
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-26 15:05:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yini4632

铁虫 (初入文坛)
自己顶
回复此楼
4楼2013-10-08 16:08:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ndsc

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
劝你小心一点，黑曲霉致癌的哦。。。如果只是做检测的话，可以扩增出结果就好，不用在意小结，要结果。
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-08 17:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huayueyang

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
买个商品化的专门针对真菌RNA提取试剂盒是最好的。
赞一下 回复此楼
坚持！
6楼2013-10-16 22:48:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yini4632

铁虫 (初入文坛)
尝试用PVP和巯基乙醇加入到trizol中很好的提取到了RNA（反转录CDNA扩增结果比较好，没有DNA），但是就是RNA电泳只看见一些5.8s条带，点样孔很亮，怀疑是PVP加入太多，堵塞点样孔（用了没加PVP的提取，有DNA污染，但是点样孔正常）
赞一下 回复此楼
7楼2013-10-31 18:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到了加入氯仿最上层也是黑色的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-03-04 22:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天天ai学习

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 渊博震天 at 2017-03-04 22:44:09
我也遇到了加入氯仿最上层也是黑色的

加pvp

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
9楼2017-03-06 00:39:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
内容已删除
回复此楼
10楼2017-03-06 07:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yini4632 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +11 1234567wang 2026-05-17 13/650 2026-05-20 18:55 by tanfancy
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +6 fummck 2026-05-20 6/300 2026-05-20 17:29 by 姜太公烤鱼
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +6 jyang1999 2026-05-16 7/350 2026-05-20 16:39 by feng6531
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 8/400 2026-05-20 09:32 by xtlilibin
[基金申请] 河北省自然科学基金 +3 Peterchao 2026-05-18 3/150 2026-05-20 08:57 by 霸_霸
[教师之家] 上海大学实验技术岗位非升即走 +12 嘻嘻哈哈乐呵呵 2026-05-15 13/650 2026-05-20 08:34 by xli1984
[文学芳草园] 献血感触 +6 呀呀好傻 2026-05-19 11/550 2026-05-19 22:26 by 而立得乐
[基金申请] 2026山东省优青 +3 luckinging 2026-05-14 4/200 2026-05-19 16:15 by 52wls
[考博] 26/27申博自荐-锂/钠电池方向 5+3 狗头军师. 2026-05-15 4/200 2026-05-19 09:10 by moonboat
[基金申请] 同样的基金本子，换个专家直接从C变A！ (金币-10) +3 国自然国社科中 2026-05-19 3/150 2026-05-19 08:50 by Equinoxhua
[基金申请] 别被青基扩招骗了！26年科研内卷才刚刚开始 +3 国自然国社科中 2026-05-14 4/200 2026-05-19 08:48 by archvillain
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +7 小王求读研 2026-05-15 8/400 2026-05-19 08:27 by zhyzzh
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[文学芳草园] 半夜喝咖啡 +3 myrtle 2026-05-15 5/250 2026-05-18 01:03 by 小沈2018
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人（2026.09） +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
[有机交流] 求助2，4-二氯-5-嘧啶甲醛的合成方法 20+3 光吃不拉 2026-05-14 6/300 2026-05-16 19:46 by Equinoxhua
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭