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崔永霞

铁虫 (小有名气)

[求助] 引物设计

我最近在做基因克隆的实验,设计了好几次引物都扩不出全长来,感觉快奔溃了,有没有哪位高手可以帮我设计对引物啊,可以的话我把基因序列发过去,拜托各位高手了。
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每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
崔永霞: 金币+1, 有帮助 2013-09-27 12:41:12
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-28 20:40:13
引用回帖:
14楼: Originally posted by 崔永霞 at 2013-09-25 20:42:42
我是在CDS的两端设计的上下游引物啊,分别跨过了起始密码子和终止密码子,可是还是扩不出来啊?我也不不知道原因是什么?我是以DNA为模板的,是不是不应该是以DNA为模板啊?应该是提RNA,然后反转录,再然后以CNA为 ...

可以以DNA为模板,你的扩增体系及程序有无问题呢?你的退火温度各方面是否合适?你怀疑引物有问题,那好办,交给生工或其他一些公司,让专业的人帮你设计,免费的。
思路决定出路。。。
15楼2013-09-26 17:07:52
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守望者047

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-09-20 19:57:27
崔永霞: 金币+1, 有帮助 2013-09-22 14:29:51
扩未知序列全长需要做race,需要设计很多对引物。如果目的序列是已知全长序列的一部分,可以把全长序列(或者Genebank登录号)和目的序列的范围传上来。
数往者顺,知来者逆!
2楼2013-09-20 19:39:35
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-21 02:03:12
崔永霞: 金币+1, 有帮助 2013-09-25 20:34:25
求助-基因克隆及引物设计的问题
http://muchong.com/html/201203/4208171.html
3楼2013-09-20 19:58:52
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15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
崔永霞: 金币+25, ★★★很有帮助 2013-09-21 17:00:34
我看看
262358773@qq.com

发你的序列 和你设计的引物来  顺便简单介绍下啦
4楼2013-09-20 22:13:45
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