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liuli-90

铁虫 (初入文坛)

[交流] RT老是做不出来,请各位大戏帮忙指点指点 已有9人参与

本人最近在做RT,是个新手,刚接触分子生物学。PCR之后,老是出现弥散状,模板浓度和退货温度都进行了摸索,还是出现弥散现象,不知道是不是RNA的问题,请各位大侠帮忙分析分析
RT老是做不出来,请各位大戏帮忙指点指点
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jiang701820

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你先跑一个18s,15S, 5S看一下你提的RNA有没有降解
4楼2013-09-18 12:52:48
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普通回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用模板试一个看家基因的PCR看看是什么结果

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-09-17 21:13:33
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-09-17 21:13:33
用模板试一个看家基因的PCR看看是什么结果

怎么找看见基因,不会啊,麻烦再说详细点,谢谢
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
3楼2013-09-17 21:25:08
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jiang701820

银虫 (小有名气)

对了,你反转之前测了浓度么?
5楼2013-09-18 12:53:54
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跳舞的骆驼

金虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你跑得是cDNA吗?
6楼2013-09-18 14:57:30
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lagopsis

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

7楼2013-09-19 10:18:28
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jiang701820 at 2013-09-18 12:53:54
对了,你反转之前测了浓度么?

测了
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
8楼2013-09-19 15:09:50
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lagopsis at 2013-09-19 10:18:28
提取的RNA测一下A260/280,比值太大也和降解有关系。

测的A260/280比值符合要求,但是RNA跑电泳,发现要么有蛋白污染,要么有降解,不知道是什么原因
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
9楼2013-09-19 15:12:30
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 跳舞的骆驼 at 2013-09-18 14:57:30
你跑得是cDNA吗?

不是,是以cDNA为模板,PCR之后的电泳图,不知道是什么原因导致这种现象
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
10楼2013-09-19 15:13:58
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