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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RT老是做不出来，请各位大戏帮忙指点指点
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)

[交流] RT老是做不出来，请各位大戏帮忙指点指点 已有9人参与

本人最近在做RT，是个新手，刚接触分子生物学。PCR之后，老是出现弥散状，模板浓度和退货温度都进行了摸索，还是出现弥散现象，不知道是不是RNA的问题，请各位大侠帮忙分析分析
RT老是做不出来，请各位大戏帮忙指点指点
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
1楼 2013-09-17 20:54:41
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jiang701820

银虫 (小有名气)
★
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你先跑一个18s，15S, 5S看一下你提的RNA有没有降解
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4楼2013-09-18 12:52:48
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bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用模板试一个看家基因的PCR看看是什么结果
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liuli-90
2楼2013-09-17 21:13:33
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-09-17 21:13:33
用模板试一个看家基因的PCR看看是什么结果

怎么找看见基因，不会啊，麻烦再说详细点，谢谢
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
3楼2013-09-17 21:25:08
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jiang701820

银虫 (小有名气)
对了，你反转之前测了浓度么？
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5楼2013-09-18 12:53:54
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跳舞的骆驼

金虫 (初入文坛)
★
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你跑得是cDNA吗？
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6楼2013-09-18 14:57:30
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lagopsis

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
7楼2013-09-19 10:18:28
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jiang701820 at 2013-09-18 12:53:54
对了，你反转之前测了浓度么？

测了
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
8楼2013-09-19 15:09:50
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lagopsis at 2013-09-19 10:18:28
提取的RNA测一下A260/280，比值太大也和降解有关系。

测的A260/280比值符合要求，但是RNA跑电泳，发现要么有蛋白污染，要么有降解，不知道是什么原因
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
9楼2013-09-19 15:12:30
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 跳舞的骆驼 at 2013-09-18 14:57:30
你跑得是cDNA吗？

不是，是以cDNA为模板，PCR之后的电泳图，不知道是什么原因导致这种现象
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
10楼2013-09-19 15:13:58
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