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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RT老是做不出来，请各位大戏帮忙指点指点
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by jiang701820 at 2013-09-18 12:52:48
你先跑一个18s，15S, 5S看一下你提的RNA有没有降解

跑的时候发现RNA有降解，但是测的A260/280符合要求，一般在1.9和2.1之间，为什么电泳结果是降解呢？？？
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
11楼2013-09-19 15:15:50
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jiang701820

银虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by liuli-90 at 2013-09-19 15:09:50
测了...

怎么样？260/280咋样？
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12楼2013-09-19 23:06:44
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郑顺利

金虫 (正式写手)
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把模板稀释100倍再p
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努力过才不会留太多的遗憾
13楼2013-09-20 07:42:24
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zhaolf

木虫 (著名写手)

胖虎爱唱歌
★
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11楼: Originally posted by liuli-90 at 2013-09-18 23:15:50
跑的时候发现RNA有降解，但是测的A260/280符合要求，一般在1.9和2.1之间，为什么电泳结果是降解呢？？？...

有点降解没关系，我每次提RNA 都有降解，但是做RT-PCR结果都还可以。你先P个持家基因试试，如果是拟南芥，就比如GAPC,ACTIN2，ACTIN8.
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我是胖虎，我是孩子王！
14楼2013-09-20 08:20:58
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奋力小子

木虫 (著名写手)

铁杆木虫
★
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看看操作上面有没有什么步骤做得不对规范的，刚刚开始的人往往会弄错一些基本的东西，正好是个检验自己的机会，不得就找个师兄，师姐问问，他们应该能看出点门道儿来

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种下梧桐树，凤凰自然来
15楼2013-09-20 08:38:35
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547star

木虫 (著名写手)
★
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RNA提取，RT这些没描写一点，光说PCR不好，有何用
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为什么
16楼2013-09-20 16:02:51
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15879003030

铜虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by liuli-90 at 2013-09-17 21:25:08
怎么找看见基因，不会啊，麻烦再说详细点，谢谢...

用ACT1的引物去P一次   还是这样子就是RNA的问题
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17楼2013-09-20 17:57:41
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 547star at 2013-09-20 16:02:51
RNA提取，RT这些没描写一点，光说PCR不好，有何用

我是用试剂盒提的
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
18楼2013-09-20 23:53:11
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liuli-90

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by jiang701820 at 2013-09-19 23:06:44
怎么样？260/280咋样？

有时候是1.9多，不到2.0,有时候是2.009
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
19楼2013-09-20 23:56:27
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