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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Triton X-114法提取膜蛋白
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小墨825

新虫 (小有名气)

[求助] Triton X-114法提取膜蛋白

利用Triton X-114法分层得到膜蛋白（下层），怎么把Triton X-114去除？有没有可能将膜蛋白转移到水相？衷心求助！
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1楼 2013-09-17 18:52:04
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-09-18 11:52:01
膜蛋白在水相中可溶吗（我认为不可溶）？去除表面活性剂之后，蛋白还有活性吗（我认为会沉淀的）？将膜蛋白转移到水相的办法就是用表面活性剂。不可以去除表面活性剂。非要去除表面活性剂的方法也有很多，比如稀释， ...

我们之前过柱都不去除的，那是因为去垢剂的浓度低，现在经过两相分离，下层都是去污相，呈油状，我也不敢直接上柱，实验室只有superdex 200.但是也要置换成下一步的起始缓冲液，经过您这样提醒似乎置换才是我需要做的而不是去除，之前我也有闪过会出现沉淀的想法，或许还可以复溶？？？
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8楼2013-09-18 16:09:58
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-17 22:41:16
TRITON X-114:2-(2-[4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenoxy]ethoxy)ethanol;二乙二醇单[(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基]醚;聚氧乙烯辛烷基苯酚醚，是一种表面活性剂，会结合到膜蛋白质的表面形成一层亲水层，而表面活性剂的疏水层会结合到膜蛋白质的分子表面，这样包裹了TRITON X-114的蛋白质本身就到了水溶液里
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2楼2013-09-17 22:24:52
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小墨825: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-09-18 15:31:42
要把表面活性剂与膜蛋白质拆开，用分子筛层析分离出表面活性剂的疏水层会结合的膜蛋白质后，放置于烧杯的水溶液中，然后加大水溶液的非极性即可，比如加入水溶中乙醚。
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3楼2013-09-17 22:28:53
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
然后用透析和超滤很容易出去蛋白质溶液中的有机分子，留下蛋白质。
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4楼2013-09-17 22:31:27
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