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小墨825

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[求助] Triton X-114法提取膜蛋白

利用Triton X-114法分层得到膜蛋白（下层），怎么把Triton X-114去除？有没有可能将膜蛋白转移到水相？衷心求助！

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1楼 2013-09-17 18:52:04

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小墨825

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引用回帖:

6楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-09-18 11:52:01
膜蛋白在水相中可溶吗（我认为不可溶）？去除表面活性剂之后，蛋白还有活性吗（我认为会沉淀的）？将膜蛋白转移到水相的办法就是用表面活性剂。不可以去除表面活性剂。非要去除表面活性剂的方法也有很多，比如稀释， ...

我现在得到的下层很粘稠，不好进行下一步的纯化实验，目的是想去除Ttriton X-114.尝试过丙酮沉淀和透析，前者蛋白大量损失，后者根本透不出来，稀释很大倍数都透不出来。我可以使用低浓度的另外的表面活性剂进行置换，您觉得可行么？样品十分粘稠，过分子筛是否也不可行？稀释之后蛋白浓度又达不到，希望您再提意见！

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7楼2013-09-18 15:31:17

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凌波丽

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-17 22:41:16

TRITON X-114:2-(2-[4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenoxy]ethoxy)ethanol;二乙二醇单[(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基]醚;聚氧乙烯辛烷基苯酚醚，是一种表面活性剂，会结合到膜蛋白质的表面形成一层亲水层，而表面活性剂的疏水层会结合到膜蛋白质的分子表面，这样包裹了TRITON X-114的蛋白质本身就到了水溶液里

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2楼2013-09-17 22:24:52

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