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sunyan0927

铜虫 (初入文坛)

[求助] waters液相色谱

最近新买了一台waters的液相色谱,C18的反向柱子,紫外检测器,测试醛腙,结果测样品时柱压变高(比一星期前测标样时高了10PSI),样品保留时间提前(约1min),这是为什么呀,请教各位虫友啊!有没有什么解决的方案!
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pp123cjs

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
release53: 金币+4, 感谢应助,辛苦啦 2013-09-15 14:28:51
第一个问题是----压力。压力在10个PSI不是大问题。
第二个问题是----出峰提前。首先说下为什么出峰会提前。色谱柱上键合了很多C18,我们姑且说它键合了100个。随着我们用流动相冲洗色谱柱+做样,这100个C18不可能牢固到一个都不掉下来。如果有5个掉下来了,那么色谱柱的疏水性就变弱,那么100个C18和95个C18相比,保留行为一定有差别。95个C18一定没有100个C18劲儿大。这时候就会出现样品提前出来了。
纵观这两个问题,应该是色谱柱的筛板稍微发生了点变化。不过保留时间1min的漂移问题也不大,随着做样保留时间的漂移都属于正常。如果想恢复一下,可以用疏水性的流动相和极性的流动相相继平衡色谱柱,最后会收到较好的收效。
6楼2013-09-13 16:09:14
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