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sunyan0927

铜虫 (初入文坛)

[求助] waters液相色谱

最近新买了一台waters的液相色谱,C18的反向柱子,紫外检测器,测试醛腙,结果测样品时柱压变高(比一星期前测标样时高了10PSI),样品保留时间提前(约1min),这是为什么呀,请教各位虫友啊!有没有什么解决的方案!
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deqingzgj5913

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
release53: 金币+1, 辛苦了 2013-09-15 14:28:05
10psi很小很小,这个非常正常,不用担心。可能是进样多了,柱头有点东西堵了。出峰时间变化跟柱子和流动相有关。waters的液相质量还是挺好的,不用当心。而且只要每批次样品和标样出峰稳定就行,也不会影响结果。
2楼2013-09-13 13:52:33
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zxwcn

铁杆木虫 (著名写手)

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换根柱子看看是柱子的问题还是仪器问题。如果是柱子问题,用流动相好好冲下柱子。如果是仪器问题,逐段排查。
3楼2013-09-13 14:00:37
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
release53: 金币+1, 辛苦辛苦 2013-09-15 14:28:22
10psi还算正常,另外一些旧仪器波动在50以内就算正常。保留时间得看你的环境,柱是否平衡,一般柱平衡后进样保留时间在1min左右波动也算正常
悲催的研发!
4楼2013-09-13 15:06:59
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小明2007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
估计平衡时间不够,造成峰出来时间提前;多冲柱子,增加平衡时间,再重新检测。
5楼2013-09-13 15:45:20
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pp123cjs

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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release53: 金币+4, 感谢应助,辛苦啦 2013-09-15 14:28:51
第一个问题是----压力。压力在10个PSI不是大问题。
第二个问题是----出峰提前。首先说下为什么出峰会提前。色谱柱上键合了很多C18,我们姑且说它键合了100个。随着我们用流动相冲洗色谱柱+做样,这100个C18不可能牢固到一个都不掉下来。如果有5个掉下来了,那么色谱柱的疏水性就变弱,那么100个C18和95个C18相比,保留行为一定有差别。95个C18一定没有100个C18劲儿大。这时候就会出现样品提前出来了。
纵观这两个问题,应该是色谱柱的筛板稍微发生了点变化。不过保留时间1min的漂移问题也不大,随着做样保留时间的漂移都属于正常。如果想恢复一下,可以用疏水性的流动相和极性的流动相相继平衡色谱柱,最后会收到较好的收效。
6楼2013-09-13 16:09:14
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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10psi变化不大,Waters的第一针一般不要,就是我们一般从第二针开始算,第一针不太稳定
7楼2013-09-14 10:19:06
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502859345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10psi好正常啊,只要对照品的出峰时间与样品对应上就ok了。
8楼2013-09-15 11:52:18
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