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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 关于氯化铝用于总黄酮含量测定显色的相关问题
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908355950

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于氯化铝用于总黄酮含量测定显色的相关问题

本人要测总黄酮，每个这个菌类药材的文献可以参考，想知道亚硝酸钠-氯化铝 -氢氧化钠显色与直接用氯化铝显色用于总黄酮含量的测定有哪些区别？还有我的样品中没有芦丁，但没有其它的对照品，那我可以不可用芦丁做对照品来测定总黄酮？请好心人帮忙解答！
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1楼 2013-09-12 10:37:15
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cwgzd2001

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 908355950 at 2013-09-13 10:05:14
我这两个方法都做了预实验，亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法时当我加入氢氧化钠时，一下子颜色就变成紫红色了，这是正常现象吗，还有就是我做了全波长扫描，没有文献上所说的在510nm左右出现最大吸收，反倒是在200 ...

1、首先要清楚分光光度的原理，要知道吸光度是可以累积的，所以扫描的目的是选择测定波长，要求样品未显色前在该波长下无吸收或吸收较弱，显色后有较大吸收，所以一般都在400nm以后了。
2、两个方法都可以使用，我的经验是如果使用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法，样品显色后在500nm左右有吸收，就选择该法；如果是在500nm没有吸收，就使用亚硝酸钠-氯化铝-氢氧化钠显色法，一般样品在415nm处有最大吸收。这与样品中黄酮结构有关，主要是3-羟基有无。
3、标准品的选择，若样品中黄酮化合物已知，最好是选择含量最高的或主要结构类型的黄酮成分，如果样品中黄酮化合物不清楚，一般选择芦丁，遵循药典。
希望能对你有所帮助。
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5楼2013-09-15 23:42:17
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zzb7855

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2013-09-12 18:36:58
亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法是经典的方法，氯化铝的方法也可以。可以用芦丁做对照是可以的。
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2楼2013-09-12 11:19:11
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908355950

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zzb7855 at 2013-09-12 11:19:11
亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法是经典的方法，氯化铝的方法也可以。可以用芦丁做对照是可以的。

我这两个方法都做了预实验，亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法时当我加入氢氧化钠时，一下子颜色就变成紫红色了，这是正常现象吗，还有就是我做了全波长扫描，没有文献上所说的在510nm左右出现最大吸收，反倒是在200多的时候出现很大的吸收，我用不加芦丁的做空白对照，这个200多的吸收还是很明显的，们能不能给我一点改进意见啊！
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3楼2013-09-13 10:05:14
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zzb7855

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 908355950 at 2013-09-13 10:05:14
我这两个方法都做了预实验，亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法时当我加入氢氧化钠时，一下子颜色就变成紫红色了，这是正常现象吗，还有就是我做了全波长扫描，没有文献上所说的在510nm左右出现最大吸收，反倒是在200 ...

黄酮类化合物的3—羟基、4—羟基或5—羟基、4－羰基或邻二位酚羟基，与铝盐进行络合反应，在碱性条件下生成红色的络合物。加了氢氧化钠后产生紫红色是正常的。200多的吸收是末端吸收，很多没有紫外吸收的在200左右也会表现出吸收峰的，不必管他。实验中络合物的吸收应该在510nm附近。
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4楼2013-09-15 14:25:10
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