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RT-PCR
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| 请教下各位大神，是是做realtimePCR之前要先做RT-PCR呀？做半定量和全定量PCR的前提是什么呢？ |
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reallpf
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-09-11 19:39:20
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realtime PCR即实时荧光定量PCR，模板需要是双链核酸分子。看你的需要，举例说明：如果直接检测基因，利用DNA为模板，则不需要RT-PCR；如果是研究转录水平，则需要提取RNA先进行RT-PCR得到双链核酸分子，才能进行后续实验。 半定量和定量PCR的前提？看你自己的需要了。 半定量是指设定内参，以内参为标准，同时进行定量PCR，通过与内参的Ct值对比，来达到目的基因定量的目标。 定量PCR是指首先得到严格意义的1拷贝，2拷贝...的模板，然后制作标准曲线（此时需要做到扩增效率100%）；然后再进行研究样本的定量PCR，通过标准曲线计算，来达到目的基因定量的目标。 个人见解，共参考。 |
2楼2013-09-11 15:10:01
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