| 查看: 307 | 回复: 1 | ||
[求助]
RT-PCR
|
| 请教下各位大神，是是做realtimePCR之前要先做RT-PCR呀？做半定量和全定量PCR的前提是什么呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有175人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
reallpf
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 6
- 应助: 150 (高中生)
- 金币: 3388.3
- 散金: 2
- 红花: 12
- 帖子: 342
- 在线: 72.6小时
- 虫号: 1892494
- 注册: 2012-07-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-09-11 19:39:20
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-09-11 19:39:20
|
realtime PCR即实时荧光定量PCR，模板需要是双链核酸分子。看你的需要，举例说明：如果直接检测基因，利用DNA为模板，则不需要RT-PCR；如果是研究转录水平，则需要提取RNA先进行RT-PCR得到双链核酸分子，才能进行后续实验。 半定量和定量PCR的前提？看你自己的需要了。 半定量是指设定内参，以内参为标准，同时进行定量PCR，通过与内参的Ct值对比，来达到目的基因定量的目标。 定量PCR是指首先得到严格意义的1拷贝，2拷贝...的模板，然后制作标准曲线（此时需要做到扩增效率100%）；然后再进行研究样本的定量PCR，通过标准曲线计算，来达到目的基因定量的目标。 个人见解，共参考。 |
2楼2013-09-11 15:10:01
