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piaoyingaza

木虫 (著名写手)

[求助] 脂质体转染是不是一定要用无血清培养基

求助各位高手,敝人准备做MSC转染,用invitrogen的lipo2000分别转siRNA和shDNA到MSC中,但是我现在手头上只有MSC完全培养基,没有无血清培养基,请教各位,在转染之前我能否用完全培养基来溶解siRNA和shDNA,还是必须要用无血清培养基来溶,谢谢!(ps:我这种培养基很贵且成分不明,没法自己配,经费所限又不能另外订购无血清的,请大家帮帮我,谢谢)
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MarchZR

银虫 (小有名气)

脂质体转染,瞬时表达的话,转染过程有血清会影响转染效率,但现在最新的转染试剂可能已经克服此难题了,但是操作最好还是无血清吧,也不麻烦
7楼2015-09-15 09:33:01
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查看全部 8 个回答

hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
piaoyingaza: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-09-10 18:20:28
由于血清中含有大量蛋白和其他生物成分可能会同脂质体形成复合物导致核酸和脂质体的复合物不能形成。另外血清中的成分对脂质体和细胞膜的结合同样可能产生影响。所以不建议使用含血清培养基。LZ可以试试其他的转染试剂和转染方法。但转染试剂同样不便宜。算下来还不如无血清培养基,分装专门用于转染。另外含血清的转染风险比较大,效率很低,如果可以invitrogen就会在说明书中注明了。毕竟有些娇气的细胞在无血清培养基中活不了几小时。考虑到siRNA和细胞的成本,还是另卖培养基吧。或者查查新型的转染试剂。
2楼2013-09-10 15:41:27
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piaoyingaza

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-10 15:41:27
由于血清中含有大量蛋白和其他生物成分可能会同脂质体形成复合物导致核酸和脂质体的复合物不能形成。另外血清中的成分对脂质体和细胞膜的结合同样可能产生影响。所以不建议使用含血清培养基。LZ可以试试其他的转染试 ...

多谢大侠指点
3楼2013-09-10 18:20:48
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qinqin7516

新虫 (初入文坛)

不是的,我们就用有血清的,只是在配置脂质体和质粒混合物的时候用opti-MEm
4楼2013-10-09 16:31:07
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