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高手请进--金黄色葡萄球菌的electroporation问题
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各位虫友们， 目前这个问题已经困惑我了将近半年的时间，真心的恳请虫友们帮帮我。 为了做一个临床株的mutant strain， 我需要将一个重组的plasmid通过electroporation导入到这个金黄色葡萄球菌中。已经几乎确定过了所有步骤没有弄错--先酶切质粒和target DNA--进行ligation之后--tansformation到E.coli(DH5a)--electroporation到RN4220--细菌正常长出--再提质粒--electroporation到这个临床株的competent cells-------------什么也没长出来（大概做了几十次，从检查competent cells到重组plasmid测序及PCR确认等等）！！！ 真心着急，pasmid进不去，就做不了mutant strain，实验就不能继续往下进行。希望虫友们能给出一些指点，建议，和一些相关资料能供我学习。在此，先谢过了！！   |
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tanxiaojuan
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