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3 race做不出来
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常贺坦
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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虫号: 2603160
[交流]
3 race做不出来
最经在做race,3race一直做不出来,出的带基本上都是NUPM单向引物跑出的带,提的RNA两条带,28s没有18s的亮。求教有什么方法能够解决。
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1楼
2013-09-06 17:36:29
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PCR-CL
新虫
(初入文坛)
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(小学生)
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虫号: 2224095
是含polyA尾的基因吗?材料是来源吧真核生物?
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7楼
2014-04-09 19:14:24
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zljuile0713
木虫
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帖子: 99
在线: 40.2小时
虫号: 2540226
我也是个新手,最近也在做RACE,据说做RACE对RNA 的要求很高,LZ只有两条带貌似不太行呢,LZ可以尝试换质量更高更好的RNA试试。
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3楼
2013-09-14 14:27:01
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bioplant
木虫
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帖子: 454
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虫号: 115908
28S带弱主要原因是样品研磨不彻底。3RACE失败的常见原因是3‘特异性引物方向设计反了。如果没反,则设计巢氏引物,以第一次PCR产物为模板进行巢氏PCR。
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4楼
2013-10-01 00:35:25
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天空2011
铜虫
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虫号: 1426468
楼主应该交代一下是做mRNA还是RNA病毒的race,如果是mRNA的应该是很简单的 ,takara的试剂盒就完全可以解决,另外做不出来可以换一下方法 像自己很成接头做 或者用INVITROGEN OR CLONTECH 的试剂盒试试,RNA 只要不是有很厉害的降解 问题应该不大 最后附张你RNA 的电泳图
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5楼
2013-10-02 10:57:32
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