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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 3 race做不出来
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常贺坦

新虫 (初入文坛)

[交流] 3 race做不出来

最经在做race，3race一直做不出来，出的带基本上都是NUPM单向引物跑出的带，提的RNA两条带，28s没有18s的亮。求教有什么方法能够解决。
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RACE

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1楼 2013-09-06 17:36:29
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zljuile0713

木虫 (小有名气)
我也是个新手，最近也在做RACE，据说做RACE对RNA 的要求很高，LZ只有两条带貌似不太行呢，LZ可以尝试换质量更高更好的RNA试试。
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3楼2013-09-14 14:27:01
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bioplant

木虫 (正式写手)
28S带弱主要原因是样品研磨不彻底。3RACE失败的常见原因是3‘特异性引物方向设计反了。如果没反，则设计巢氏引物，以第一次PCR产物为模板进行巢氏PCR。
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4楼2013-10-01 00:35:25
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天空2011

铜虫 (小有名气)
楼主应该交代一下是做mRNA还是RNA病毒的race，如果是mRNA的应该是很简单的 ，takara的试剂盒就完全可以解决，另外做不出来可以换一下方法 像自己很成接头做 或者用INVITROGEN OR CLONTECH 的试剂盒试试，RNA 只要不是有很厉害的降解 问题应该不大 最后附张你RNA 的电泳图
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5楼2013-10-02 10:57:32
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zl/Sophia

铁虫 (初入文坛)
我最近也一直在做3‘RACE，一直不出结果，不知道什么原因，RNA质量很好，有什么经验可以交流一下！
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6楼2014-04-09 17:11:52
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PCR-CL

新虫 (初入文坛)
是含polyA尾的基因吗？材料是来源吧真核生物？
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7楼2014-04-09 19:14:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)
先把RNA的图贴出来，用的什么试剂盒，具体只能做的，我们好帮你分析，最近做了十来个基因的5RACE和3RACE，也没像你那么纠结啊

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2014-04-11 14:35:56
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xiweijia

金虫 (正式写手)
你做的什么物种？根据我们对多个物种RNA的比较，发现无脊椎动物的18s亮度比28s高，脊椎动物则相反。一般书上都是以脊椎动物为例。
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9楼2014-04-11 18:41:35
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zhuchun0102

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 14:35:56
先把RNA的图贴出来，用的什么试剂盒，具体只能做的，我们好帮你分析，最近做了十来个基因的5RACE和3RACE，也没像你那么纠结啊

您好 我的3‘RACE也一直做不出来  但是找不到原因
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10楼2019-10-25 10:08:03
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yingying15882楼
2013-09-09 16:36   回复  
常贺坦(金币+1): 谢谢参与
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