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常贺坦

新虫 (初入文坛)


[交流] 3 race做不出来

最经在做race,3race一直做不出来,出的带基本上都是NUPM单向引物跑出的带,提的RNA两条带,28s没有18s的亮。求教有什么方法能够解决。
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zljuile0713

木虫 (小有名气)


我也是个新手,最近也在做RACE,据说做RACE对RNA 的要求很高,LZ只有两条带貌似不太行呢,LZ可以尝试换质量更高更好的RNA试试。
3楼2013-09-14 14:27:01
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bioplant

木虫 (正式写手)


28S带弱主要原因是样品研磨不彻底。3RACE失败的常见原因是3‘特异性引物方向设计反了。如果没反,则设计巢氏引物,以第一次PCR产物为模板进行巢氏PCR。
4楼2013-10-01 00:35:25
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天空2011

铜虫 (小有名气)


楼主应该交代一下是做mRNA还是RNA病毒的race,如果是mRNA的应该是很简单的 ,takara的试剂盒就完全可以解决,另外做不出来可以换一下方法 像自己很成接头做 或者用INVITROGEN OR CLONTECH 的试剂盒试试,RNA 只要不是有很厉害的降解 问题应该不大 最后附张你RNA 的电泳图
5楼2013-10-02 10:57:32
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zl/Sophia

铁虫 (初入文坛)


我最近也一直在做3‘RACE,一直不出结果,不知道什么原因,RNA质量很好,有什么经验可以交流一下!
6楼2014-04-09 17:11:52
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