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zy橡皮泥

新虫 (初入文坛)

[求助] 酵母OCH1基因敲除

你好,我是做酵母OCH1基因敲除的,用的是两次筛选,第一次是用5-FOA筛选的,敲掉和假阳性的都会生长,然后再进行高温抑制生长,但是高温的部分每次几乎都长,没有长出来的进行PCR验证后也是假阳性,已经筛了几百株了,有点要崩溃了,想请教一下大家谁有好的基因敲除的方法,,谢谢~~~
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sunday1234

新虫 (小有名气)

你好,我想问一下将酵母涂布5-foa后,高温培养可以提高筛选效率吗?为什么要高温,原理是什么?高温是多少度
6楼2014-08-06 14:46:43
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-28 22:43:23
如果是毕赤酵母的话已经有卖的了(biogrammatics),才400美元
2楼2013-09-04 22:16:11
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-26 15:09:15
而且这个菌株不但缺失了och1,还转入了糖苷酶,因此糖链是5个甘露糖结构
3楼2013-09-04 22:21:14
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zy橡皮泥

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaocy8903 at 2013-09-04 22:21:14
而且这个菌株不但缺失了och1,还转入了糖苷酶,因此糖链是5个甘露糖结构

是吗?我做的就是毕赤酵母JC308,哪里有卖缺陷菌株的呀?
4楼2013-09-25 14:04:32
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