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haloki

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蒽酮硫酸比色法测总糖,平行样相差很大。请虫友们帮忙分析一下哪里出了问题?

我采用蒽酮硫酸法测定茯砖茶中总糖含量,但做出来的三个平行之间相差有0.01~0.03,数据很不理想。做了好几次还是这样。我的方法如下,请虫友们帮忙分析一下是哪里出了问题。
试剂:100ml98%浓硫酸(量筒量取)中加入60mg蒽酮,搅拌溶解。
样液:稀释5倍的茶汤。
步骤:1ml样液加入8ml蒽酮硫酸试剂,摇匀,准确沸水浴3min,取出流水冷却。620nm测量OD值。空白用1ml去离子水做。
我觉得可能出现问题的地方是:1,浓硫酸用量筒量取不精确。2,样液稀释时定容出现误差。3,沸水浴时受热不均匀。
我测的最大值是0.2几,是不是可以不用稀释样液呢?
看文献上说沸水浴后要冰水浴,我没有冰水浴直接流水冷却会不会有偏差?
在样液中加入浓硫酸时,摇匀前表层是深蓝绿色的,摇匀后就变得很暗,没有绿色了,是不是茶汤本身颜色也有影响?

望虫友们能指点迷津,在此谢过了!
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wuxiao549

禁虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
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2楼2013-09-01 09:44:54
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chais

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
0.1-0.3的差,是什么,OD值?
计算cv值,比绝对值可靠些
3楼2013-09-01 09:56:42
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liushuminlsm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zybpxy: 金币+2, 鼓励应助 2013-09-01 12:09:32
茶叶颜色较深,蒽酮硫酸法测定结果偏大哦~建议可以用活性炭吸附脱色后再测定
4楼2013-09-01 10:15:21
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qiuminfang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,你的浓硫酸用量筒量取不会使平行样相差很大,只要你的蒽酮在浓硫酸中溶解充分,搅拌均匀就好;其次,沸水浴后应用冰水浴;至于你说的样品液定容时出现误差的可能性是有的,多做几次重复实验吧!
5楼2013-09-02 08:46:16
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小张cc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我做过茶汤总糖的测定,这个要严格控制水浴时间。还要注意的是,1ml样品滴加到蒽酮试剂中是要缓慢加入(可以一滴滴加),边加边摇晃试管。对操作的严格控制,可以减少误差
要努力啊!
6楼2013-09-02 15:39:05
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haloki

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chais at 2013-09-01 09:56:42
0.1-0.3的差,是什么,OD值?
计算cv值,比绝对值可靠些

0.01~0.03是平行样间OD值的偏差范围。
7楼2013-09-02 23:47:44
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haloki

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chais at 2013-09-01 09:56:42
0.1-0.3的差,是什么,OD值?
计算cv值,比绝对值可靠些

0.01~0.03是平行样间OD值的偏差范围。
8楼2013-09-03 17:11:29
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