应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR过程断电疑问
61/1返回列表
查看: 4534  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuqinglosin

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR过程断电疑问 已有5人参与

PCR28个循环时突然断电，没有拿出来，在pcr仪里放了20个小时后接着循环10次。有几个疑问：
1.在变性时中断，温度随时间而缓慢降至室温，这个过程中DNA会正常复性吗还是与引物结合？如果重新PCR从变性开始循环，是否会正常进行?
2.在退火阶段中断，温度随时间而缓慢降至室温，这个过程中DNA与引物结合的链有变化吗？如果重新PCR从变性开始循环，是否会正常进行？
3.在延伸阶段中断，温度随时间而缓慢降至室温，这个过程中有什么变化？如果重新PCR从变性开始循环，是否会正常进行？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-08-31 11:07:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意孤城_

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-08-31 11:49:24
断电了，不管哪个阶段如果从新接通电源，会造成P不出来。具体原因不清楚 不过尝试过，P不出来的
赞一下 回复此楼
2楼2013-08-31 11:35:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxiumin565

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
断电不清楚，我试过一个PCR分成好几次（实验室的PCR仪跑10个循环左右就停了，只能停了后接着重新开）是可以出来的。good luck。
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-31 13:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilunanxia

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得哪个阶段停电影响都不是很大，但是楼主的问题在于一点是你中间中断的时间有点长，酶之类的在非储藏温度下那么长时间估计不行了。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-08-31 15:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不能低估Taq酶的活性，如果没有DNase的污染，其他的都应该比较稳定的。再接着跑，然后上胶，你现在已经是nothing to lose了。
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
5楼2013-08-31 23:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
断电时在循环的什么过程并不怎么重要。如果已经P了28个循环，应该有相当多的产物了，这样再P时目的片段容易直接自身发生配对而不是与引物配对，即使再做10个循环，效果可能与28个循环时差不多。如果PCR程序才开始没多久，产物还很少，继续P的话问题不大。
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-31 23:16:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuqinglosin 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 能否申诉？ +6 echo8914667 2026-08-30 7/350 2026-08-31 08:41 by kingkocxr
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭