应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR过程断电疑问
61/1返回列表
查看: 4441  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuqinglosin

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR过程断电疑问 已有5人参与

PCR28个循环时突然断电，没有拿出来，在pcr仪里放了20个小时后接着循环10次。有几个疑问：
1.在变性时中断，温度随时间而缓慢降至室温，这个过程中DNA会正常复性吗还是与引物结合？如果重新PCR从变性开始循环，是否会正常进行?
2.在退火阶段中断，温度随时间而缓慢降至室温，这个过程中DNA与引物结合的链有变化吗？如果重新PCR从变性开始循环，是否会正常进行？
3.在延伸阶段中断，温度随时间而缓慢降至室温，这个过程中有什么变化？如果重新PCR从变性开始循环，是否会正常进行？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-08-31 11:07:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意孤城_

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-08-31 11:49:24
断电了，不管哪个阶段如果从新接通电源，会造成P不出来。具体原因不清楚 不过尝试过，P不出来的
赞一下 回复此楼
2楼2013-08-31 11:35:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxiumin565

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
断电不清楚，我试过一个PCR分成好几次（实验室的PCR仪跑10个循环左右就停了，只能停了后接着重新开）是可以出来的。good luck。
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-31 13:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilunanxia

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得哪个阶段停电影响都不是很大，但是楼主的问题在于一点是你中间中断的时间有点长，酶之类的在非储藏温度下那么长时间估计不行了。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-08-31 15:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不能低估Taq酶的活性，如果没有DNase的污染，其他的都应该比较稳定的。再接着跑，然后上胶，你现在已经是nothing to lose了。
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
5楼2013-08-31 23:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
断电时在循环的什么过程并不怎么重要。如果已经P了28个循环，应该有相当多的产物了，这样再P时目的片段容易直接自身发生配对而不是与引物配对，即使再做10个循环，效果可能与28个循环时差不多。如果PCR程序才开始没多久，产物还很少，继续P的话问题不大。
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-31 23:16:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuqinglosin 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 会评 +5 无名者登山 2026-07-15 5/250 2026-07-15 18:15 by 杠就是你对
[基金申请] 生生命学部会评 +3 wuke100666 2026-07-15 3/150 2026-07-15 17:11 by kingkocxr
[基金申请] E口会评 +11 布布和一二 2026-07-13 13/650 2026-07-15 16:34 by Kittylucky
[基金申请] E口青C会评结束了吗？ 40+3 小小书虫c 2026-07-14 9/450 2026-07-15 16:04 by 安静的知了
[基金申请] 生命口C13面上会评时间 +6 luckinging 2026-07-14 9/450 2026-07-15 14:39 by 雨冰共舞
[教师之家] 内心匮乏 +13 水冰月月野兔 2026-07-12 13/650 2026-07-15 14:21 by jiduquegai
[文学芳草园] 你可曾有过这种感受？ +3 Jeanya 2026-07-09 6/300 2026-07-15 11:07 by mbtwt
[论文投稿] 农业机械学报投稿周期 +3 G0DLIN 2026-07-14 7/350 2026-07-15 09:26 by xs74101122
[基金申请] 国自然面上D口祈祷 +4 monkeynana 2026-07-14 4/200 2026-07-15 09:14 by 白水煮
[论文投稿] 跨出版社商投稿 20+4 倪好520 2026-07-13 4/200 2026-07-15 08:35 by bobvan
[基金申请] 没收到消息，再次陪跑 +3 天空星辰fly 2026-07-14 3/150 2026-07-14 19:14 by 6543yes
[基金申请] 不要再数国自然申请书的 filecode 的分隔符个数了 +13 sadpencil 2026-07-12 20/1000 2026-07-14 13:12 by 杠就是你对
[基金申请] 明天E口面上会评 +8 布布和一二 2026-07-12 9/450 2026-07-13 22:59 by QTSorange
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +4 S778950906 2026-07-08 6/300 2026-07-13 16:22 by tfang
[基金申请] 祈祷青基必中 50+6 hadengry 2026-07-09 16/800 2026-07-12 20:31 by 登山虫虫
[考博] 27届辽宁大学应届毕业生申博 +3 可乐微风大海 2026-07-09 3/150 2026-07-10 21:23 by 贪玩的研究僧
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +17 且听虎啸 2026-07-09 23/1150 2026-07-10 19:51 by sdfapple719
[有机交流] chemdraw 20+5 ?慕鱼? 2026-07-08 6/300 2026-07-10 15:37 by 紫枫星域
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭