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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跑pcr 跑到一半，停电了！
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zlh275285433

银虫 (正式写手)

[求助] 跑pcr 跑到一半，停电了！

跑pcr 跑到一半停电了，请问多长时间间隔内跑的pcr可以用于跑胶，为什么？
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1楼 2013-04-29 11:58:40
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dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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zlh275285433(gyesang代发): 金币+2, 鼓励应助交流！ 2013-04-29 19:49:54
zlh275285433: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-30 07:42:33
跑了多少个循环是关键，小于20个循环建议重新做，大于25个循环可以尝试回收。当然还要看你下一步准备做什么，如果是胶回收做亚克隆以上的标准使用，如果是genome walking, DGGE，RT-PCR那还是建议重做!
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5楼2013-04-29 17:25:00
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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zlh275285433(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-04-29 15:34:20
zlh275285433: 金币+1 2013-04-30 07:40:41
你是什么意思？如果循环数目过少，跑胶看不见的，需要继续补足循环数目后再检测。如果停电时间过长，酶可能会失活，最好重新加酶后再P。
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2楼2013-04-29 14:56:15
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senix

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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zlh275285433: 金币+1 2013-04-30 07:41:34
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-04-30 14:05:45
重新做吧，反正PCR也不麻烦，时间也不长！
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做实验就是和上帝玩游戏！
3楼2013-04-29 16:39:58
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莓林塔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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zlh275285433: 金币+1 2013-04-30 07:44:29
不是在延伸阶段停的问题不大吧？可以继续接着P啊~
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4楼2013-04-29 16:49:02
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zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zlh275285433: 金币+1 2013-04-30 07:43:38
zlh275285433(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-04-30 14:04:33
循环次数少的话最好重新做，如果快p完了停电，可以尝试跑下胶。最好重新来过。
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生而不息，奋斗不止！
6楼2013-04-29 21:49:59
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yilunanxia

金虫 (正式写手)

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-04-30 14:04:43
我有一次是被师兄给不小心断电的，然后继续跑，结果也没啥问题
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7楼2013-04-30 09:07:29
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-04-30 14:04:59
就是嘛，为了以防万一，就重新来过吧
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做出色的科研人
8楼2013-04-30 11:00:32
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-04-30 14:05:16
我有一次做PCR，忘了设置循环数，直到跑了电泳总结问题才发现，后来用无酶水补足至所需体积，按之前的循环数做也出来了。我觉得你可能确实要估摸一下大概跑了多久，再重新设定程序（减少循环数）做一下，反正也不麻烦，直接放进去反应就行了。或者按5楼说的，看自己的实验目的作选择。其次这个酶容不容易失不失活也跟酶的类型有关吧，个人看法，仅做参考，呵呵
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思路决定出路。。。
9楼2013-04-30 11:37:15
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zlh275285433

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yilunanxia at 2013-04-30 09:07:29
我有一次是被师兄给不小心断电的，然后继续跑，结果也没啥问题

断电时间太长了。。。现在决定再做个！
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10楼2013-04-30 12:29:11
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