24小时热门版块排行榜    

查看: 1316  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序问题

目的片段连表达载体,菌落PCR有条带,然后送去测序,先用自己的特异性引物测序能测到目的片段,用通用引物测就是无信号了。。。。我这是没连进去么?但是双酶切验证切开了啊。。。求高手指点迷津啊。。。。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dewdan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-08-28 16:28:37
两个问题:
1. 自己提的质粒质量不高--这种情况 重新转化提取质粒送测序

2. 通用引物不好,用错通用引物了,或者载体上没有该通用引物位点

我是直接送菌液测序的,通用引物应该不会错,是载体说明书上提供的序列,之前有一个基因也是这个载体,用这个通用引物测序成功了
3楼2013-08-30 09:37:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-30 13:39:28
两个问题:
1. 自己提的质粒质量不高--这种情况 重新转化提取质粒送测序

2. 通用引物不好,用错通用引物了,或者载体上没有该通用引物位点
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-08-28 16:28:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by dewdan at 2013-08-30 09:37:46
我是直接送菌液测序的,通用引物应该不会错,是载体说明书上提供的序列,之前有一个基因也是这个载体,用这个通用引物测序成功了...

你可以自己抽质粒,质粒鉴定好了,再送去测序
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-08-30 11:30:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dewdan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by gyesang at 2013-08-30 11:30:09
你可以自己抽质粒,质粒鉴定好了,再送去测序...

直接送菌液不行吗?有什么区别吗?
5楼2013-08-31 20:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:30 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 06:57 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 02:40 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:34 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +5 德尚中行 2026-08-27 6/300 2026-08-29 18:10 by manplx
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
请填处理意见