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验证烟粉虱生物型
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前段时间，试着提取了一下单头烟粉虱的DNA，总是不出来。师姐说是量太少了的缘故，但也有人能提出来。 我的步骤是这样的： 1、把烟粉虱置于滴有20μlDNA裂解液的封口膜上，用0.2mlPCR管底部研磨 2、将匀浆液吸入1.5ml的离心管中，加入1μl的蛋白酶K，混匀，置于60℃水浴3h，中途追加1μl的蛋白酶K 3、每管加入178μl的dd水，100℃水浴5min 4、取100μl提取液，加入两倍体积的预冷无水乙醇，-20℃2h 5、12000r/min离心20min。DNA沉淀室温晾干 6、每管加20μl的dd水，溶解后放于4℃保存待用 然后是做PCR扩增，电泳。因为电泳上除了marker，没有其他任何结果。怀疑应该是DNA没有提出来，应该不是PCR和电泳的问题吧。。。 [ Last edited by wanghf_6134 on 2013-8-26 at 15:40 ] |
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