10楼: Originally posted by FTD顺 at 2013-08-26 13:28:27
上样液含有自来水
或者上样液酸性而用铁棍搅拌都有可能引入铁离子。

具体的洗脱理论指导，我也不懂，做的还太少。而我这个其实没怎么关注过洗脱液的pH。
建议的那个不同pH测静态吸附率的方法还是很简单的；
...

11楼: Originally posted by linxt2005 at 2013-08-26 14:44:51
建议：
1. 电泳时加入上柱前的样品，确保目的蛋白是有表达的，或者更准确地讲，是存在于你上样前的样品里面的；
2. 层析时在2M NaCl后添加一步，使用0.5M NaOH再洗脱3个CV，然后取样电泳。

第1个建议不用说了， ...

12楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2013-08-28 11:09:56
恩，后来发现用1M NaOH洗下来了我的目的蛋白，看来是挂的太牢了，洗不下来，现在准备试一下用改变ph来洗脱了！你的柱子已经重生好了吗？！我的柱子是GE公司的SP Sepharose Fast Flow。...

14楼: Originally posted by linxt2005 at 2013-08-28 11:31:49
不是，用NaOH才能洗脱下来，说明蛋白不稳定，或者层析方法不对，
可能是缓冲液、填料、复性方法的关系。

15楼: Originally posted by FTD顺 at 2013-08-28 14:12:12
重生过了 ，对比实验待做。

你可以用碳酸钠试试，不一定要用氢氧化钠。...