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jiangcheng14

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[求助] 什么实验可以验证一个蛋白对dna的nicking作用

纯化了一个蛋白，怎样做实验看它有没有对dna的nicking作用

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如何查找一个蛋白DNA结合域的基因序列？已经有4人回复

1楼 2013-08-23 16:57:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

凌波丽

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+5, 鼓励交流 2013-09-20 20:21:14

我已经想好了试验方法，有很多种。我需要楼主先回答一些问题，以便对于试验方法有所选择。
1.该蛋白质的识别DNA双链是否有已知的DNA的二级结构或者一级结构信息，或者是否有同源蛋白的识别DNA双链是否有已知的DNA的二级结构或者一级结构信息作为参考？
2.目的蛋白质的基因是否知道？或者是否有同源蛋白的基因已经获知？
3.目的蛋白质切割某一段DNA的双链序列的一条链上切出一个缺口是仅切割不连接？还是既切又连？
4.目的蛋白质的一级结构是否已知？
5.目的蛋白质是否含有任何已知的辅基或者辅酶或者金属离子？
6.目的蛋白质在不切割一段DNA的双链序列的一条链时是否与DNA非共价结合？
7.是否已知可能存在的目的蛋白质的非共价结合的调控蛋白质？
8.目的蛋白质的细胞定位是否已知？

这些问题实际上都可能包含在我提供的protocols中，如果楼主希望我提供的protocols有具体的参考价值，请回答以上问题。对于以上问题没有答案也是一种的有效的答案，对于选择protocols仍然是有帮助的。