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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 什么实验可以验证一个蛋白对dna的nicking作用
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jiangcheng14

金虫 (小有名气)

[求助] 什么实验可以验证一个蛋白对dna的nicking作用

纯化了一个蛋白，怎样做实验看它有没有对dna的nicking作用
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1楼 2013-08-23 16:57:40
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

我已经大致有了试验流程的设计方案，晚些时间回答你。
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4楼2013-08-24 20:28:37
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试验方法有很多种，但是我要知道：你说的nicking具体指什么？要达到什么程度？
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2楼2013-08-23 23:12:56
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jiangcheng14

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-08-23 23:12:56
试验方法有很多种，但是我要知道：你说的nicking具体指什么？要达到什么程度？

我想看看它会不会在某一段双链序列的一条链上切出一个缺口
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3楼2013-08-24 11:13:54
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+5, 鼓励交流 2013-09-20 20:21:14
我已经想好了试验方法，有很多种。我需要楼主先回答一些问题，以便对于试验方法有所选择。
1.该蛋白质的识别DNA双链是否有已知的DNA的二级结构或者一级结构信息，或者是否有同源蛋白的识别DNA双链是否有已知的DNA的二级结构或者一级结构信息作为参考？
2.目的蛋白质的基因是否知道？或者是否有同源蛋白的基因已经获知？
3.目的蛋白质切割某一段DNA的双链序列的一条链上切出一个缺口是仅切割不连接？还是既切又连？
4.目的蛋白质的一级结构是否已知？
5.目的蛋白质是否含有任何已知的辅基或者辅酶或者金属离子？
6.目的蛋白质在不切割一段DNA的双链序列的一条链时是否与DNA非共价结合？
7.是否已知可能存在的目的蛋白质的非共价结合的调控蛋白质？
8.目的蛋白质的细胞定位是否已知？

这些问题实际上都可能包含在我提供的protocols中，如果楼主希望我提供的protocols有具体的参考价值，请回答以上问题。对于以上问题没有答案也是一种的有效的答案，对于选择protocols仍然是有帮助的。
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5楼2013-08-26 22:31:13
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