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yuren2009

木虫 (正式写手)

[求助] 液氮研磨

求助:

最近提了几次真菌,效果不是很好,检测时有的无条带或者弥散,看不到主带??从开始分析下,发现液氮研磨后的菌丝粉末放置片刻,没有及时转移到裂解液中混匀,酶对DNA降解的影响有多大??会是其中的一个原因,感觉其他的操作没有什么错误。用的植物基因组试剂盒。
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学习使你立于不败之地
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-22 00:04:30
yuren2009: 金币+1 2013-08-22 10:58:05
应该不是这个原因,因为DNA是很稳定的东西,除非你加入了酶,否则不可能降解到没条带,估计还是方法的问题,有些盒子对特殊植物or植物组织的提取能力不同!
互助互励,共奋共进!!
2楼2013-08-21 21:47:11
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-08-22 00:04:37
yuren2009: 金币+1 2013-08-22 10:58:13
楼上正解。也可以考虑样品量够不够,研磨是否足够,如果担心试剂盒不好,其实自己配试剂还是很方便的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
你的日子如何,你的力量也必如何!
3楼2013-08-21 22:27:02
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
yuren2009: 金币+1 2013-08-22 10:58:19
前面两楼说的都对,另外,你测过DNA的浓度及纯度没有?如果浓度和纯度都OK,那很有可能跑电泳出了问题。
思路决定出路。。。
4楼2013-08-22 10:43:24
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zq347597638

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yuren2009: 金币+1 2013-08-23 22:58:59
yuren2009: 金币+2 2013-08-23 22:59:18
如果确定试剂盒是适合提取你那目的DNA的话,楼主就要注意操作步骤!本来用试剂盒提取出来的DNA量就少。
液氮研磨,要研磨充分 并尽快放进裂解液里
用试剂盒提取的时候,最后用ddH2O或者TE洗涤的时候,最好把洗涤液点在膜的中间。
5楼2013-08-22 13:49:37
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yuren2009

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zq347597638 at 2013-08-22 13:49:37
如果确定试剂盒是适合提取你那目的DNA的话,楼主就要注意操作步骤!本来用试剂盒提取出来的DNA量就少。
液氮研磨,要研磨充分 并尽快放进裂解液里
用试剂盒提取的时候,最后用ddH2O或者TE洗涤的时候,最好把洗涤液 ...

后来有条带的,弥散也较严重。不知道是不是前期将解原因。

[ 发自小木虫客户端 ]
学习使你立于不败之地
6楼2013-08-22 14:59:01
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张小逸

铜虫 (小有名气)

请问你,我有蘑菇的样品,能否用植物基因组试剂盒提取总DNA?
7楼2013-10-25 10:58:26
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yuren2009

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张小逸 at 2013-10-25 10:58:26
请问你,我有蘑菇的样品,能否用植物基因组试剂盒提取总DNA?

我们实验室提取真菌都是用的植物基因组试剂盒
学习使你立于不败之地
8楼2013-10-25 12:08:50
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