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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 液氮研磨
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yuren2009

木虫 (正式写手)

[求助] 液氮研磨

求助：

最近提了几次真菌，效果不是很好，检测时有的无条带或者弥散，看不到主带？？从开始分析下，发现液氮研磨后的菌丝粉末放置片刻，没有及时转移到裂解液中混匀，酶对DNA降解的影响有多大??会是其中的一个原因，感觉其他的操作没有什么错误。用的植物基因组试剂盒。
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学习使你立于不败之地
1楼 2013-08-21 21:21:30
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-22 00:04:30
yuren2009: 金币+1 2013-08-22 10:58:05
应该不是这个原因，因为DNA是很稳定的东西，除非你加入了酶，否则不可能降解到没条带，估计还是方法的问题，有些盒子对特殊植物or植物组织的提取能力不同！
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互助互励，共奋共进！！
2楼2013-08-21 21:47:11
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-08-22 00:04:37
yuren2009: 金币+1 2013-08-22 10:58:13
楼上正解。也可以考虑样品量够不够，研磨是否足够，如果担心试剂盒不好，其实自己配试剂还是很方便的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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你的日子如何，你的力量也必如何！
3楼2013-08-21 22:27:02
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yuren2009: 金币+1 2013-08-22 10:58:19
前面两楼说的都对，另外，你测过DNA的浓度及纯度没有？如果浓度和纯度都OK，那很有可能跑电泳出了问题。
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思路决定出路。。。
4楼2013-08-22 10:43:24
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zq347597638

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuren2009: 金币+1 2013-08-23 22:58:59
yuren2009: 金币+2 2013-08-23 22:59:18
如果确定试剂盒是适合提取你那目的DNA的话，楼主就要注意操作步骤！本来用试剂盒提取出来的DNA量就少。
液氮研磨，要研磨充分 并尽快放进裂解液里
用试剂盒提取的时候，最后用ddH2O或者TE洗涤的时候，最好把洗涤液点在膜的中间。
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5楼2013-08-22 13:49:37
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yuren2009

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zq347597638 at 2013-08-22 13:49:37
如果确定试剂盒是适合提取你那目的DNA的话，楼主就要注意操作步骤！本来用试剂盒提取出来的DNA量就少。
液氮研磨，要研磨充分 并尽快放进裂解液里
用试剂盒提取的时候，最后用ddH2O或者TE洗涤的时候，最好把洗涤液 ...

后来有条带的，弥散也较严重。不知道是不是前期将解原因。

[ 发自小木虫客户端 ]
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学习使你立于不败之地
6楼2013-08-22 14:59:01
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张小逸

铜虫 (小有名气)
请问你，我有蘑菇的样品，能否用植物基因组试剂盒提取总DNA？
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7楼2013-10-25 10:58:26
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yuren2009

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 张小逸 at 2013-10-25 10:58:26
请问你，我有蘑菇的样品，能否用植物基因组试剂盒提取总DNA？

我们实验室提取真菌都是用的植物基因组试剂盒
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学习使你立于不败之地
8楼2013-10-25 12:08:50
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