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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

[交流] wb

最近在做WB,但是总数出问题，最初是用0.2um的PVDF膜做的，但是发光后没有亮带，后来改为0.45um的PVDF膜，转过去的蛋白全部都发光，技术说是发生了交叉反应，如果是这样的话不是说抗体没有特异性了吗，还有哪位大侠知道是什么原因啊，应该要怎么样改进
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1楼 2013-08-20 10:27:17
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
57楼: Originally posted by doctor俊 at 2013-08-22 09:10:57
应该不是膜的关系,可能与所用抗体和抗体洗脱有关系吧

我是用含0.15%吐温的TBST洗的，一抗孵育结束洗了3次，每次10分钟，二抗孵育结束以后洗了5次，每次10分钟，显色后发现背景深又继续洗的，还是那样
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58楼2013-08-22 09:19:42
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wswsjz

木虫 (职业作家)
★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
加油!加油!加油!相信你一定能成为科研大牛，到时候多多传受经验！
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3楼2013-08-20 10:54:25
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ctiehua

木虫 (知名作家)
★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主，给不给金币在于楼主，祝你顺利，好运！红包拿来！
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13楼2013-08-20 11:46:03
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