24小时热门版块排行榜    

查看: 4852  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导

Sample Text

我做的是马氏珠母贝的外套膜和边缘膜的RNA的提取

操作步骤是这样的:
1、样品早上10点从贝中提取出来,接着在液氮中冻存并保存了4个小时
2、下午2点做,用于depc处理过的2微升管取样并加入tirzol  1ml,加入小钢珠,用匀浆器匀浆8分钟
3、用镊子取出小钢珠,放置5min
4、加入氯仿200微升,涡旋30s
4、12000r,4℃,15min
5、吸取上清400微升于depc处理过的1.5ml离心管中,异丙醇400微升
6、室温放置10min
7、12000r,4℃,10min
8、弃去上清,加入1ml 的75%depc配置的乙醇,剧烈震荡
9、12000r,4℃,5min
10、在垂直层流操作台晾干10min,加入20微升的depc水溶解(没有pcr ,也没有测过其浓度,师姐说不用,测没意义)。
11、琼脂糖凝胶电泳 ,其余样品-80℃保存。
12、琼脂糖凝胶的配置:
        凝胶浓度:1%   
       电压:120V
       电流:60MA
       跑的时间:30min
缓冲液:0.5xTBE
琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导
RNA电泳图.PNG

[ Last edited by 键盘上的脚丫 on 2013-8-19 at 20:53 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 键盘上的脚丫 at 2013-08-20 12:20:43
恩恩,我准备去测一下od值先,下午再跑一次电泳,谢谢吖...

测OD也无法判断呵,只能大概看看纯度和产量什么的。
应该是样品本身RNA就长这个样子。
伟大航线....
12楼2013-08-21 12:08:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这是RNA吗?少了一条带啊。

为什么不用热酚法抽RNA,你这个方法我没用过不知道效果。
2楼2013-08-19 21:06:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15879003030

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 15879003030 at 2013-08-19 21:06:37
这是RNA吗?少了一条带啊。

为什么不用热酚法抽RNA,你这个方法我没用过不知道效果。

附上我这里跑RNA的图
琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导-1
rna.jpg

3楼2013-08-19 21:13:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimingwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-20 18:34:33
和抽提没有太大关系,样品已降解。你用的方法是公司的标准方法。但是,建议 8、中剧烈震荡。改为轻轻上下翻转2次。
Let'sdoit.
4楼2013-08-19 21:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 0854复试调剂 276 +3 wmm9 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:13 by 热情沙漠
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 化工专硕342,一志愿大连理工大学,求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
信息提示
请填处理意见