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freezymind新虫 (初入文坛)
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[求助]
关于EDC/NHS 请教各位大牛
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最近在做Fe3O4-Au纳米粒子连赫赛汀（一种单克隆抗体药物）的实验，试了挺多遍都没有理想的结果，各位大牛帮忙看看哪里出问题了： 我的具体步骤： 1、5mg连有PEG-COOH纳米粒子溶于5ml水中， 2、加入固体EDC.HCL 220mg(文献上看来的，50、100mg也都试过） sulfo-NHS 200mg(EDC.HCL/sulfo-NHS 1:1 5:1 10:1也都试过），调节PH至5.0左右，室温卵育15min(30min 1h 2h都试过）， 3、硼砂缓冲液调节至7.0（亦曾试过用超滤管去除EDC NHS后调节PH）加入赫赛汀室温2h（室温过夜、4°2h过夜都试过）。 离心后没什么沉淀出来啊，文献上说会有沉淀出现的。请大牛们帮我看看哪里出问题了，感激不尽 |
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sunshaokai
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红舟流星: 金币+3, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块积极应助交流 2013-08-26 23:32:26
红舟流星: 金币+3, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块积极应助交流 2013-08-26 23:32:26
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（1）如果你只是想在磁球表面接上两种蛋白，我建议你使用粒径较大的羧基功能化磁球（很容易制备），如果你对磁球粒径没有限制的话，可以使用粒径较大的羧基功能化磁球（几十nm的），这样直接用磁铁既可以实现分离提纯，非常方便。 （2）至于接两种蛋白，你只要控制好投料比，可以先将一种蛋白接上去，它是不会把所用COOH都反应没的；然后再接第二种药物既可，所有过程都可以用磁铁吸附提纯，非常方便。 （3）顺便回复你问的关于怎么判断有没有羧基的问题。。。你可以做zeta电势测定，如果有很多COOH的话（或者总COOH数-总NH2数），这个值会很负，比如-20... |
19楼2013-08-26 22:31:17
xingjiuwcc
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2楼2013-08-17 00:08:04
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| 你看下这个贴：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5331024 我觉得你的步骤有问题，一般不这样做吧。还有你的EDC.HCL/sulfo-NHS都是EDC的量高，是不是该NHS的量多投些吧。我最近也在调研文献，也要做这种反应，希望多交流下吧。 |
3楼2013-08-17 09:36:42
freezymind
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